犬腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒科研
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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-06 06:27:34瀏覽次數(shù):132次
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人*原(PT)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人*原(PT)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人*原(PT)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
38509 *標準品 Rimantadine Hydrochloride 300mg 1501-84-4
38510 瑞美松龍標準品 Rimexolone 100mg 49697-38-3
38511 *標準品 Risedronate Sodium 350mg 115436-72-1
38512 *標準品 Risperidone 200mg
38513 *系統(tǒng)適用性用混合物標準品 10mg
38514 *雜質(zhì)混合物標準品 ea
38515 *標準品 Ritodrine Hydrochloride 200mg 23239-51-2
38516 *標準品 Ritonavir 200mg 155213-67-5
38517 *相關(guān)物質(zhì)混合物標準品 50mg
38518 卡巴拉汀酒石酸鹽K-異構(gòu)體 20mg NA
38519 酒石酸卡巴拉汀標準品 Rivastigmine Tartrate 200mg 129101-54-8
38520 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 15mg 32634-68-7
38521 *相關(guān)物質(zhì)B標準品 15mg 25081-93-0
38522 *標準品 Rocuronium Bromide 250mg 119302-91-9
38523 羅匹尼羅相關(guān)物質(zhì)B標準品 50mg 221264-21-7
38524 *標準品 Ropivacaine 200mg 84057-95-4
38525 鹽酸*對照品標準品 Ropivacaine Hydrochloride 200mg 132112-35-7
38526 鹽酸*有關(guān)物質(zhì)A對照品標準品 25mg 21436-98-6
38527 鹽酸*有關(guān)物質(zhì)B對照品標準品 50mg 112773-90-7
38528 洛克沙砷標準品 Roxarsone 200mg 121-19-7
38529 盧非酰胺標準品 Rufinamide ea 106308-44-5
38530 蘆丁標準品 Rutin 100mg 250249-75-3
38531 糖精標準品 Saccharin 200mg 1981/7/2
38532 糖精鈣標準品 Saccharin Calcium 100mg 6381-91-5
38533 糖精鈉標準品 Saccharin Sodium 100mg 6155-57-3
38534 貫葉連翹提取物標準品 600mg 84082-80-4
38535 2-羥基芐胺標準品 Salicylamide 200mg 65-45-2
38536 水楊酸標準品 Salicylic Acid 125mg 69-72-7
38537 水楊酸相關(guān)物質(zhì)A標準品 100mg 9-96-7
38538 水楊酸相關(guān)物質(zhì)B標準品 100mg 636-46-4
38539 水楊酸片標準品 30tables 69-72-7
38540 昔美酸沙美特羅標準品 Salmeterol Xinafoate 150mg 94749-08-3
38541 沙美特羅相關(guān)物質(zhì)A標準品 10mg
38542 沙美特羅相關(guān)物質(zhì)B標準品 Salmeterol Related Compound B 10mg 108928-81-0
38543 雙水楊酸酯標準品 Salsalate 150mg 552-94-3
38544 甲磺酸沙奎拉韋標準品 Saquinavir Mesylate 200mg 149845-06-7
38545 沙奎拉韋相關(guān)物質(zhì)A標準品 Saquinavir Related Compound A 25mg
38546 *標準品 Scopolamine Hydrobromide 250mg 6533-68-2
38547 東莨菪內(nèi)酯標準品 Scopoletin 20mg 92-61-5
38548 司可*標準品 Secobarbital CII 200mg 76-73-3
38549 *標準品 Selegiline Hydrochloride 200mg 14611-52-0
38550 L-硒代蛋氨酸標準品 Selenomethionine 100mg 3211-76-5
38551 番瀉苷標準品 Sennosides 500mg 517-43-1
38552 番瀉苷A標準品 Sennoside A 20mg 81-27-6
38553 番瀉苷B標準品人*原(PT)ELISA試劑盒 Sennoside B 20mg 128-57-4
38554 芝麻油標準品 Sesame Oil (AS) 1ml×2ampules 8008-74-0
38555 芝麻油相關(guān)物質(zhì)A標準品 6mg×3vials 2190-21-8
38556 芝麻油相關(guān)物質(zhì)B標準品 6mg×3vials 64550-34-1
38557 L-*標準品 L-Serine 200mg 56-45-1
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人*原(PT)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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