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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-10 14:41:19瀏覽次數(shù):185次
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人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
38159 撲酸標(biāo)準(zhǔn)品 Pamoic Acid 250mg 130-85-8
38160 泮庫溴銨標(biāo)準(zhǔn)品 Pancuronium Bromide 200mg 15500-66-0
38161 泛醇消旋體標(biāo)準(zhǔn)品 Panthenol, Racemic 200mg 16485-10-2
38162 泛酯標(biāo)準(zhǔn)品 Pantolactone 500mg 599-04-2
38163 *鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Pantoprazole Sodium 200mg 138786-67-1
38164 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 127780-16-9
38165 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 102625-64-9
38166 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 97963-62-7
38167 *相關(guān)物質(zhì)D和F混合物標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 624742-53-6
38168 *相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
38169 木瓜酶標(biāo)準(zhǔn)品 Papain 1g 9001-73-4
38170 對氯*標(biāo)準(zhǔn)品 Parachlorophenol 500mg 106-48-9
38171 石蠟標(biāo)準(zhǔn)品 Paraffin 1g 8002-74-2
38172 對甲雙酮標(biāo)準(zhǔn)品 Paramethadione 500mg 115-67-3
38173 醋酸帕拉米松標(biāo)準(zhǔn)品 Paramethasone Acetate 200mg 1597-82-6
38174 帕苯達(dá)唑標(biāo)準(zhǔn)品 Parbendazole 200mg 14255-87-9
38175 巴吉林鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Pargyline Hydrochloride 200mg 306-07-0
38176 帕立骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 131918-61-1
38177 帕立骨化醇溶液標(biāo)準(zhǔn)品 3ml
38178 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Paroxetine Hydrochloride 350mg 110429-35-1
38179 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
38180 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 130855-30-0
38181 *相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
38182 *相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
38183 *相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 110429-36-2
38184 *相關(guān)物質(zhì)G標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
38185 *系統(tǒng)適用混合物A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
38186 小白菊內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品 Parthenolide 25mg 20554-84-1
38187 顆粒計(jì)數(shù)器用套件標(biāo)準(zhǔn)品 Particle Count Set 2blanks and 2suspe
38188 花生油標(biāo)準(zhǔn)品 Peanut Oil (AS) 1g 8002/3/7
38189 酸環(huán)戊丁心安標(biāo)準(zhǔn)品 Penbutolol Sulfate 200mg 38363-32-5
38190 *標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillamine 200mg 52-67-5
38191 二硫*標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillamine Disulfide 100mg 20902-45-8
38192 芐星*標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillin G Benzathine 200mg 41372-02-5
38193 *鉀標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillin G Potassium 200mg 113-98-4
38194 普魯卡因*標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillin G Procaine 200mg 6130-64-9
38195 *鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillin G Sodium 150mg 69-57-8
38196 *V標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillin V 200mg 1987/8/1
38197 *V鉀標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillin V Potassium 200mg 132-98-9
38198 依西酸噴他脒標(biāo)準(zhǔn)品 Pentamidine Isethionate 200mg 140-64-7
38199 戊烷標(biāo)準(zhǔn)品 Pentane 1.2ml×3ampules 109-66-0
38200 1-戊醇標(biāo)準(zhǔn)品 1-Pentanol 1.2ml×3ampules 71-41-0
38201 *標(biāo)準(zhǔn)品 Pentazocine CIV 500mg 359-83-1
38202 噴替酸標(biāo)準(zhǔn)品 Pentetic Acid 100mg 67-43-6
38203 戊*標(biāo)準(zhǔn)品 Pentobarbital CII 200mg 76-74-4
38204 *標(biāo)準(zhǔn)品 Pentoxifylline 200mg 6493/5/6
38205 全氟碳標(biāo)準(zhǔn)品人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 Perflubron 0.5ml 423-55-2
38206 甲磺酸培高利特標(biāo)準(zhǔn)品 Pergolide Mesylate 200mg 66104-23-2
38207 培高利特亞砜標(biāo)準(zhǔn)品 Pergolide Sulfoxide 50mg 72822-01-6
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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