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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-22 18:19:36瀏覽次數(shù):123次
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人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
37959 *標(biāo)準(zhǔn)品 Milrinone 500mg 78415-72-2
37960 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 80047-24-1
37961 礦物油標(biāo)準(zhǔn)品 Mineral Oil 1.5ml 8012-95-1
37962 鹽酸二甲胺四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品 Minocycline Hydrochloride 200mg 13614-98-7
37963 敏諾西代標(biāo)準(zhǔn)品 Minoxidil 125mg 38304-91-5
37964 *標(biāo)準(zhǔn)品 Mirtazapine 350mg 85650-52-8
37965 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 61337-68-6
37966 *混合物標(biāo)準(zhǔn)品 Mirtazapine Resolution Mixture 25mg
37967 *標(biāo)準(zhǔn)品 Misoprostol 100mg 59122-46-2
37968 絲裂霉素標(biāo)準(zhǔn)品 Mitomycin 50mg 1950/7/7
37969 米托擔(dān)標(biāo)準(zhǔn)品 Mitotane 500mg 53-19-0
37970 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Mitoxantrone Hydrochloride 400mg 70476-82-3
37971 *標(biāo)準(zhǔn)品(系統(tǒng)適用性) 0.3mg
37972 莫達(dá)非尼相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Modafinil Related Compound A 20mg 63547-24-0
37973 莫達(dá)非尼相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Modafinil Related Compound B 20mg 118779-53-6
37974 莫達(dá)非尼相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Modafinil Related Compound C 20mg 68524-30-1
37975 莫達(dá)非尼相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 Modafinil Related Compound D 20mg 574-42-5
37976 莫達(dá)非尼相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 Modafinil Related Compound E 20mg 1726-02-9
37977 莫達(dá)非尼標(biāo)準(zhǔn)品 Modafinil CIV 200mg 68693-11-8
37978 鹽酸嗎茚酮標(biāo)準(zhǔn)品 Molindone Hydrochloride 500mg 15622-65-8
37979 糖酸莫米松標(biāo)準(zhǔn)品 Mometasone Furoate 200mg 83919-23-7
37980 莫能菌素鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Monensin Sodium 200mg 22373-78-0
37981 莫諾苯宗標(biāo)準(zhǔn)品 Monobenzone 200mg 103-16-2
37982 乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品 Monoethanolamine 1ml 141-43-5
37983 單甘酯標(biāo)準(zhǔn)品 Monoglycerides 125mg 68990-53-4
37984 *一鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Monosodium Glutamate (AS) 1g 142-47-2
37985 馬來(lái)酸單十八酯標(biāo)準(zhǔn)品 Monostearyl Maleate 100mg 2424-62-6
37986 *標(biāo)準(zhǔn)品 Monukast Sodium 150mg 151767-02-1
37987 酒石酸莫侖太爾標(biāo)準(zhǔn)品 Moran Tartrate 100mg 26155-31-7
37988 *標(biāo)準(zhǔn)品 Moricizine Hydrochloride 250mg 29560-58-5
37989 一水合*標(biāo)準(zhǔn)品 Morphine Monohydrate CII (AS) 50mg 6009-81-0
37990 *標(biāo)準(zhǔn)品 Moxifloxacin Hydrochloride 200mg 186826-86-8
37991 *標(biāo)準(zhǔn)品 Mupirocin 50mg 12650-69-0
37992 *鈣標(biāo)準(zhǔn)品 Mupirocin Calcium 200mg 115074-43-6
37993 *鋰標(biāo)準(zhǔn)品 Mupirocin Lithium 100mg 73346-79-9
37994 *標(biāo)準(zhǔn)品 Mycophenolate Mofetil 200mg 128794-94-5
37995 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
37996 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 79081-87-1
37997 肉豆蔻酸標(biāo)準(zhǔn)品 Myristic Acid 200mg 544-63-8
37998 肉豆蔻醇標(biāo)準(zhǔn)品 Myristyl Alcohol 1g 112-72-1
37999 *標(biāo)準(zhǔn)品 Nabumetone 200mg 42924-53-8
38000 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 127053-22-9
38001 康格爾標(biāo)準(zhǔn)品 Nadolol 200mg 42200-33-9
38002 *標(biāo)準(zhǔn)品 Nafcillin Sodium 200mg 7177-50-6
38003 *標(biāo)準(zhǔn)品 Naftifine Hydrochloride 200mg 65473-14-5
38004 萘啶酮酸標(biāo)準(zhǔn)品人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒 Nalidixic Acid 200mg 389-08-2
38005 鹽酸烯丙*標(biāo)準(zhǔn)品 Nalorphine Hydrochloride CIII 250mg 57-29-4
38006 納洛酮標(biāo)準(zhǔn)品 Naloxone 125mg 465-65-6
38007 鈉曲酮標(biāo)準(zhǔn)品 Naltrexone 200mg 16590-41-3
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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