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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-11 01:02:20瀏覽次數(shù):119次
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人*1(VK1)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人*1(VK1)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人*1(VK1)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
37409 鹽酸*標準品 Flurazepam Hydrochloride CIV 200mg 1172-18-5
37410 *相關(guān)物質(zhì)C標準品 Flurazepam Related Compound C 50mg
37411 *相關(guān)物質(zhì)F標準品 Flurazepam Related Compound F 50mg 2886-65-9
37412 *標準品 Flurbiprofen 200mg 5104-49-4
37413 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 100mg 6341-72-6
37414 *鈉標準品 Flurbiprofen Sodium 200mg 56767-76-1
37415 氟替卡松丙酸酯相關(guān)物質(zhì)混合物標準品 25mg NA
37416 *標準品 Flutamide 200mg 13311-84-7
37417 鄰-*標準品 o-Flutamide 50mg
37418 氟替卡松丙酸酯標準品 Fluticasone Propionate 100mg 80474-14-2
37419 氟替卡松丙酸酯分離度用混合物標準品 25mg
37420 氟替卡松丙酸酯系統(tǒng)適用性用混合物標準品 25mg
37421 *標準品 Fluvoxamine Maleate 200mg 61718-82-9
37422 氟替卡松丙酸酯*分離度用混合物標準品 25mg NA
37423 *標準品 Fluvastatin Sodium 350mg 93957-55-2
37424 氟伐他汀用于系統(tǒng)適用性標準品 25mg
37425 *相關(guān)物質(zhì)B標準品 Fluvastatin Related Compound B 15mg 129332-29-2
37426 *標準品 500mg 59-30-3
37427 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 Folic Acid Related Compound A 50mg 1492-18-8
37428 刺芒柄花素標準品 Formononetin 50mg 485-72-3
37429 富馬酸*標準品 Formoterol Fumarate 100mg 183814-30-4
37430 富馬酸*系統(tǒng)適用性用混合物標準品 20mg
37431 富馬酸*分離度用混合物標準品 20mg
37432 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 Mafenide Related Compound A 50mg
37433 10-甲酰*標準品 10-Formylfolic Acid 25mg 134-05-4
37434 磷*標準品 Fosphenytoin Sodium 250mg 92134-98-0
37435 D-(-)-果糖標準品 Fructose 125mg 57-48-7
37436 L-巖藻糖標準品 L-Fucose (AS) 200mg 2438-80-4
37437 氟維司群標準品 Fulvestrant 150mg 129453-61-8
37438 氟維司群系統(tǒng)適用性用混合物標準品 15mg
37439 富馬酸標準品 Fumaric Acid 200mg 110-17-8
37440 *標準品 Furazolidone 200mg 67-45-8
37441 *標準品 Furosemide 200mg 54-31-9
37442 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 50mg 4818-59-1
37443 *相關(guān)物質(zhì)B標準品 100mg 3086-91-7
37444 *標準品 Gabapentin 250mg 60142-96-3
37445 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 50mg 64744-50-9
37446 *相關(guān)物質(zhì)B標準品 30mg 133481-09-1
37447 *相關(guān)物質(zhì)D標準品 10mg 1076198-17-8
37448 *相關(guān)物質(zhì)E標準品 25mg 667465-00-1
37449 釓雙胺標準品 Gadodiamide 500mg 131410-48-5
37450 釓雙胺相關(guān)物質(zhì)A標準品 50mg
37451 釓雙胺相關(guān)物質(zhì)B標準品 50mg
37452 釓噴酸單*標準品 Gadopentetate Monomeglumine 500mg 92923-57-4
37453 釓特醇標準品人*1(VK1)ELISA試劑盒 Gadoteridol 500mg 120066-54-8
37454 釓特醇相關(guān)物質(zhì)A標準品 50mg 120041-08-9
37455 釓特醇相關(guān)物質(zhì)B標準品 50mg 112188-16-6
37456 釓特醇相關(guān)物質(zhì)C標準品 50mg 220182-19-4
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人*1(VK1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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