人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。
36291 猴子巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 Monkey Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit 96T/48T
36292 駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 Camel Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
36293 駱駝脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Camel lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
36294 駱駝內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 Camel Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit 96T/48T
36295 駱駝轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 Camel transforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA Kit 96T/48T
36296 馬生長激素(GH)ELISA試劑盒 Equine growth hormone,GH ELISA Kit 96T/48T
36297 馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)ELISA試劑盒 Equine major histocompatibility complex,MHC/ELA ELISA Kit 96T/48T
36298 馬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 Equine Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T
36299 馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 Equine amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 96T/48T
36300 馬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 Equine Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
36301 山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 Goat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 96T/48T
36302 山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒 Goat P-Selectin/CD62P/GMP-140 ELISA Kit 96T/48T
36303 山羊促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒 Goat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit 96T/48T
36304 山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 Goat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
36305 山羊白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 Goat Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 96T/48T
36306 山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 Goat Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit 96T/48T
36307 山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 Goat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit 96T/48T
36308 山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 Goat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
36309 山羊丙酮檢測(cè)(acetone)ELISA試劑盒 Goat acetone ELISA Kit 96T/48T
36310 鹿胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒 Deer Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA Kit 96T/48T
36311 鹿內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Deer Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T
36312 鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 Deer Serum amyloid A,SAA ELISA Kit 96T/48T
36313 鹿紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒 Deer erythrocyte membrane protein,EMP ELISA Kit 96T/48T
36314 魚孕激素/孕酮（PROG）ELISA試劑盒 PROG ELISA Kit 96T/48T
36315 *(SCT)ELISA試劑盒 Salmon calcitonin,SCT ELISA Kit 96T/48T
36316 魚類甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 Fish Thyroxine,T4 ELISA Kit 96T/48T
36317 魚雌二醇（E2)ELISA試劑盒 E2 ELISA 96T/48T
36318 魚促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）ELISA試劑盒 ACTH ELISA Kit 96T/48T
36319 魚雌激素（E）ELISA試劑盒 E ELISA Kit 96T/48T
36320 魚促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒 FSH ELISA Kit 96T/48T
36321 魚促黃體激素（LH）ELISA試劑盒人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 LH ELISA Kit 96T/48T
36322 魚磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）ELISA試劑盒 AMPK ELISA Kit 96T/48T
36323 魚卵黃高磷蛋白（PV）ELISA試劑盒 PV ELISA Kit 96T/48T
36324 魚類主要組織相容性復(fù)合體（MHC）ELISA試劑盒 MHC ELISA Kit 96T/48T
36325 鮭魚補(bǔ)體蛋白3（C3）ELISA試劑盒 C3 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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