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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-13 21:21:48瀏覽次數(shù):125次
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人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
36183 兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 rabbit Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 96T/48T
36184 兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒 Rabbit soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
36185 兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 rabbit Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
36186 兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 rabbit soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit 96T/48T
36187 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒 rabbit macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit 96T/48T
36188 兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒 rabbit basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit 96T/48T
36189 兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 rabbit Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 96T/48T
36190 兔子甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 rabbit thyroxine,T4 ELISA Kit 96T/48T
36191 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 rabbit tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit 96T/48T
36192 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒 rabbit matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA Kit 96T/48T
36193 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒 rabbit matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit 96T/48T
36194 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒 rabbit matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit 96T/48T
36195 兔子睪酮(T)ELISA試劑盒 rabbit Testoterone,T ELISA Kit 96T/48T
36196 兔子肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit 96T/48T
36197 兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 rabbit Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit 96T/48T
36198 兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒 rabbit omerase,TE ELISA Kit 96T/48T
36199 兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP1/MCAF ELISA Kit 96T/48T
36200 兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 rabbit adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit 96T/48T
36201 兔子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 rabbit follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit 96T/48T
36202 兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 rabbit Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit 96T/48T
36203 兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒 rabbit Estradiol,E2 ELISA Kit 96T/48T
36204 兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 rabbit intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit 96T/48T
36205 兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 96T/48T
36206 兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 rabbit leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 96T/48T
36207 兔子白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 rabbit Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit 96T/48T
36208 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 rabbit Interleukin 8,IL-8 ELISA Kit 96T/48T
36209 兔子白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 rabbit Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 96T/48T
36210 兔子白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 rabbit Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 96T/48T
36211 兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 Rabbit Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit 96T/48T
36212 兔子白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒 Rabbit Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit 96T/48T
36213 兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 Rabbit Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
36214 兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 Rabbit Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit 96T/48T
36215 兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒Rabbit Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 96T/48T
36216 兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 rabbit Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit 96T/48T
36217 兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 rabbit Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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