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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-09 19:34:42瀏覽次數(shù):198次
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人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
36111 兔一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 Rabbit nitric oxide,NO ELISA Kit 96T/48T
36112 兔補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 Rabbit Complement 3,C3 ELISA Kit 96T/48T
36113 兔p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒 Rabbit Substance P,SP ELISA Kit 96T/48T
36114 兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 Rabbit Laminin,LN ELISA Kit 96T/48T
36115 兔*(cAMP)ELISA試劑盒 Rabbit cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit 96T/48T
36116 兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 Rabbit von Willebrand Factor,VWF ELISA Kit 96T/48T
36117 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒 Rabbit Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit 96T/48T
36118 兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 Rabbit Osteopontin,OPN ELISA Kit 96T/48T
36119 兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Rabbit lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
36120 兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒 Rabbit 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 96T/48T
36121 兔乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 Rabbit acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 96T/48T
36122 兔誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 Rabbit inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit 96T/48T
36123 兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 Rabbit Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit 96T/48T
36124 兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Rabbit Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit 96T/48T
36125 兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 Rabbit Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit 96T/48T
36126 兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 Rabbit Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit 96T/48T
36127 兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 Rabbit amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 96T/48T
36128 兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 Rabbit Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit 96T/48T
36129 兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 Rabbit Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit 96T/48T
36130 兔乙酰*(ACh)ELISA試劑盒 Rabbit acetylcholine,ACH ELISA Kit 96T/48T
36131 兔*(NA)ELISA試劑盒 Rabbit Noradrenaline,NA ELISA Kit 96T/48T
36132 兔子生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 Rabbit Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
36133 兔子α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 Rabbit Interferon α,IFN-α ELISA Kit 96T/48T
36134 兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 Rabbit E-Selectin ELISA Kit 96T/48T
36135 兔子*結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 Rabbit Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit 96T/48T
36136 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA試劑盒 Rabbit major histocompatibility complex Ⅲ,MHCⅢ/RLAⅢ ELISA Kit 96T/48T
36137 兔淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒 Rabbit lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 96T/48T
36138 兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 Rabbit catecholamine,CA ELISA Kit 96T/48T
36139 兔吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 Rabbit pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA Kit 96T/48T
36140 兔糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒 Rabbit Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 96T/48T
36141 兔半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 Rabbit Cystatin C,Cys-C ELISA Kit 96T人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒/48T
36142 兔子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒 deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit 96T/48T
36143 兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒 rabbit Tissue factor,TF ELISA Kit 96T/48T
36144 兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 Rabbit Crosslaps,Cr ELISA Kit 96T/48T
36145 兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 rabbit Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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