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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-06 03:29:39瀏覽次數(shù):177次
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人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35967 雞極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒 Chicken very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit 96T/48T
35968 雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒 Chicken Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA Kit 96T/48T
35969 雞胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒 Chicken Glucagon,GC ELISA Kit 96T/48T
35970 雞甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 Chicken Thyroxine,T4 ELISA Kit 96T/48T
35971 雞三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒 Chicken Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit 96T/48T
35972 雞抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒 Chicken anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit 96T/48T
35973 雞核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒 Chicken Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit 96T/48T
35974 雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)ELISA試劑盒 Chicken toxoplasma circulating antigen,TCA ELISA Kit 96T/48T
35975 雞甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 Chicken Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit 96T/48T
35976 雞卵黃免疫球蛋白(IgY)ELISA試劑盒 Hen egg Immunoglobulin of Yolk,IgY ELISA Kit 96T/48T
35977 雞蛋卵黃高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA試劑盒 Hen egg phosvitin phosphopeptides,PPP ELISA Kit 96T/48T
35978 雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒 Chicken Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit 96T/48T
35979 雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 Chicken Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit 96T/48T
35980 雞免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 Chicken Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T
35981 雞免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 Chicken Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 96T/48T
35982 雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit 96T/48T
35983 雞白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit 96T/48T
35984 雞主要組織相容性復(fù)合體(MHC/B)ELISA試劑盒 Chicken major histocompatibility complex,MHC/B ELISA Kit 96T/48T
35985 雞熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Chicken Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA Kit 96T/48T
35986 雞白痢抗體檢測(cè)(PD)ELISA試劑盒 Chiken Pullorum Diseaes,PD ELISA Kit 96T/48T
35987 雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒 Chicken secretory immunoglobulin A,SIgA ELISA Kit 96T/48T
35988 雞α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 Chicken Interferon α,IFN-α ELISA Kit 96T/48T
35989 雞白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit 96T/48T
35990 雞白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 96T/48T
35991 雞病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒 Chicken virus enteritis,DEV ELISA Kit 96T/48T
35992 雞肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA試劑盒 Chicken Myoglobin,MYO/MB ELISA Kit 96T/48T
35993 雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit 96T/48T
35994 雞白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit 96T/48T
35995 雞白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 Chicken Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit 96T/48T
35996 雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 Chicken Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit 96T/48T
35997 雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 Chicken C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit 96T/48T
35998 雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒 Chicken Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit 96T/48T
35999 雞免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 Chicken Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 96T/48T
36000 雞堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒(bFGF)ELISA試劑盒 Chicken basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit 96T/48T
36001 雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 Chicken Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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