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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-22 04:30:00瀏覽次數(shù):130次
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人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35859 豬*(Dex)ELISA試劑盒 Porcine Dexamethasone,Dex ELISA Kit 96T/48T
35860 豬D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 Porcine D-Dimer,D2D ELISA Kit 96T/48T
35861 豬髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 Porcine myeloperoxidase,MPO ELISA Kit 96T/48T
35862 豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 Porcine Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit 96T/48T
35863 豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 Porcine von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 96T/48T
35864 豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒 Porcine melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISA Kit 96T/48T
35865 豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 Porcine soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit 96T/48T
35866 豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒 Porcine Vascular Endothelial-Cadherin Complex,VE-cad ELISA Kit 96T/48T
35867 豬*(NE)ELISA試劑盒 Porcine Noradrenaline,NE ELISA Kit 96T/48T
35868 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 Porcine angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
35869 豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒 Porcine Factor-related Apoptosis,FAS ELISA Kit 96T/48T
35870 豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 Porcine B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit 96T/48T
35871 豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 Porcine Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA Kit 96T/48T
35872 豬一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 Porcine nitric oxide,NO ELISA Kit 96T/48T
35873 豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Porcine Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T
35874 豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit 96T/48T
35875 豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 Porcine Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit 96T/48T
35876 豬血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒 Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA Kit 96T/48T
35877 豬血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 Porcine Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit 96T/48T
35878 豬乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 Porcine acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 96T/48T
35879 豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 Porcine Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit 96T/48T
35880 豬熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Porcine Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit 96T/48T
35881 豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 Porcine Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit 96T/48T
35882 豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 Porcine Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit 96T/48T
35883 豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 Porcine C-reactive protein,CRP ELISA Kit 96T/48T
35884 豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 Porcine Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
35885 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒 swine major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡ ELISA Kit 96T/48T
35886 豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒 Porcine soluble P-selectin,sP-Selectin ELISA Kit 96T/48T
35887 豬白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 Porcine interleukin 17,IL-17 ELISA Kit 96T/48T
35888 豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Porcine myelin basic protein,MBP ELISA Kit 96T/48T
35889 豬生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 Porcine Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
35890 豬α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 Porcine Interferon α,IFN-α ELISA Kit 96T/48T
35891 豬磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 Porcine phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒96T/48T
35892 豬乙酰*(ACh)ELISA試劑盒 Porcine acetylcholine,ACH ELISA Kit 96T/48T
35893 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒 swine major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢ ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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