人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35823 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
35824 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 Rat Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit 96T/48T
35825 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA Kit 96T/48T
35826 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 1β,MIP-1β ELISA Kit 96T/48T
35827 大鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 Rat nitric oxide,NO ELISA Kit 96T/48T
35828 大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒 Rat P-Selectin ELISA Kit 96T/48T
35829 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒 Rat inhibitory subunit of NF-κBα,IKBα ELISA Kit 96T/48T
35830 豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 Procine hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA Kit 96T/48T
35831 豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(GSLT1)ELISA試劑盒 Porcine sodium-glucose cotransporter 1,GSLT1 ELISA Kit 96T/48T
35832 豬松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒 Porcine Relaxin,RLN ELISA Kit 96T/48T
35833 豬流感病毒A(FLU A)ELISA試劑盒 Porcine Influenza viruses A,FLU A ELISA Kit 96T/48T
35834 豬孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 Porcine Progesterone,PROG ELISA Kit 96T/48T
35835 豬白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 5,IL-5 ELISA Kit 96T/48T
35836 豬層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 Porcine Laminin,LN ELISA Kit 96T/48T
35837 豬Ⅱ型膠原(Col Ⅱ) ELISA試劑盒 Porcine Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
35838 豬可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 Porcine soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit 96T/48T
35839 豬白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 13,IL-13 ELISA Kit 96T/48T
35840 豬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒 Porcine Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA Kit 96T/48T
35841 豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 Porcine E-Selectin ELISA Kit 96T/48T
35842 豬褪黑素(MT)ELISA試劑盒 Porcine Melatonin,MT ELISA Kit 96T/48T
35843 豬白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA Kit 96T/48T
35844 豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒 Porcine epidemic diarrhea virus antibody,PEDV ELISA Kit 96T/48T
35845 豬傳染性胃腸炎病毒抗體(TGEV)ELISA試劑盒 Porcine Transmissible Gastroenteritis virus antibody,TGEV ELISA Kit 96T/48T
35846 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 Porcine cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA Kit 96T/48T
35847 豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)ELISA試劑盒 Porcine Glucose transporter 2,GLUT2 ELISA Kit 96T/48T
35848 豬二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒 Porcine diamine oxidase,DAO ELISA Kit 96T/48T
35849 豬膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA試劑盒 Porcine cholecystokinin,CCK ELISA Kit 96T/48T
35850 豬腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒 Porcine Intestinal trefoil factor,ITF ELISA Kit 96T/48T
35851 豬活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 Porcine Activin A,ACV-A ELISA Kit 96T/48T
35852 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)ELISA試劑盒 swine major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠ ELISA Kit 96T/48T
35853 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 Porcine Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit 96T/48T
35854 豬食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒 Porcine Orexin receptor,OXR ELISA Kit 96T/48T
35855 豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒 Porcine Orexin B,OX-B ELISA Kit 96T/48T
35856 豬白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 1α ,IL-1α ELISA Kit 96T/48T
35857 豬促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒 Porcine gastrin receptor,GsaR ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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