人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

35787 大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒  Rat plaet factor 3, PF3 ELISA Kit 96T/48T
35788 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 Rat Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit 96T/48T
35789 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒 Rat Caveolin-1,Cav-1 ELISA Kit 96T/48T
35790 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒  Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit 96T/48T
35791 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒  Rat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit 96T/48T
35792 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒  Rat Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit  96T/48T
35793 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 Rat Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA Kit 96T/48T
35794 大鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit 96T/48T
35795 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 Rat Plaet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA Kit 96T/48T
35796 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 Rat Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA Kit 96T/48T
35797 大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒 Rat Neurotrophin 4,NT-4 ELISA Kit 96T/48T
35798 大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒 Rat Neurotrophin 3,NT-3 ELISA Kit  96T/48T
35799 大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒 Rat Nerve growth factor,NGF ELISA Kit 96T/48T
35800 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 3α,MIP-3α ELISA Kit 96T/48T
35801 大鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 Rat Laminin,LN ELISA Kit 96T/48T
35802 大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒  Rat Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 96T/48T
35803 大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 96T/48T
35804 大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒  Rat Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit 96T/48T
35805 大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒  Rat Interleukin 1α ,IL-1α ELISA Kit 96T/48T
35806 大鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit 96T/48T
35807 大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒  Rat Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit 96T/48T
35808 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit 96T/48T
35809 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit 96T/48T
35810 大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 Rat Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit 96T/48T
35811 大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒  Rat intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
35812 大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒 Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit 96T/48T
35813 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒 Rat glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF ELISA Kit 96T/48T
35814 大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒 Rat Fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 96T/48T
35815 大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒  Rat Fibronectin,FN ELISA Kit 96T/48T
35816 大鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒 Rat Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF ELISA Kit 96T/48T
35817 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
35818 大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit 96T/48T
35819 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit 96T/48T
35820 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit 人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒96T/48T
35821 大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 Rat Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit 96T/48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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