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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-09 16:41:08瀏覽次數(shù):126次
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人肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35751 大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 Rat bradykinin,BK ELISA Kit 96T/48T
35752 大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒 rat Resistin ELISA Kit 96T/48T
35753 大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒 rat prolactin,PRL ELISA Kit 96T/48T
35754 大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒 rat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit 96T/48T
35755 大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 rat adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit 96T/48T
35756 大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 rat follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit 96T/48T
35757 大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒 rat Estradiol receptor,ER ELISA Kit 96T/48T
35758 大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒 Rat Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit 96T/48T
35759 大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒 Rat Big Endothelin,Big ET ELISA Kit 96T/48T
35760 大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA試劑盒 Rat very late appearing antigen,VLA ELISA Kit 96T/48T
35761 大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒 Rat Calcitonin,CT ELISA Kit 96T/48T
35762 大鼠骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 Rat Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit 96T/48T
35763 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒 Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit 96T/48T
35764 大鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 Rat Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit 96T/48T
35765 大鼠*(Cortisol)ELISA試劑盒 Rat Cortisol ELISA Kit 96T/48T
35766 大鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒 Rat Estradiol,E2 ELISA Kit 96T/48T
35767 大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒 Rat Testoterone,T ELISA Kit 96T/48T
35768 大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒 Rat Free Testoterone,F-TESTO ELISA Kit 96T/48T
35769 大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒 Rat Androstenedione,ASD ELISA Kit 96T/48T
35770 大鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒 Rat Estriol,E3 ELISA Kit 96T/48T
35771 大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒 Rat 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit 96T/48T
35772 大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒 Rat Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit 96T/48T
35773 大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 Rat thyroxine,T4 ELISA Kit 96T/48T
35774 大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 Rat Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit 96T/48T
35775 大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒 Rat Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit 96T/48T
35776 大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒 Rat Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit 96T/48T
35777 大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒 Rat Insulin,INS ELISA Kit 96T/48T
35778 大鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 Rat C-Peptide ELISA Kit 96T/48T
35779 大鼠絨毛膜*(CG)ELISA試劑盒 Rat Chorionic Gonadotrophin,CG ELISA Kit 96T/48T
35780 大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 Rat luteotropic hormone,LH ELISA Kit 96T/48T
35781 大鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒 Rat Anti-myocardial antibody,AMA ELISA Kit 96T/48T
35782 大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 Rat anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA Kit 96T/48T
35783 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA試劑盒 Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit 96T/48T
35784 大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原人肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒(CPSA)ELISA試劑盒 Rat complex edprostate specific antigen,cPSA ELISA Kit 96T/48T
35785 大鼠*(trypsin)ELISA試劑盒 Rat trypsin ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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