犬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒廠家
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-23 21:54:04瀏覽次數(shù):110次
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人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35643 大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 Rat soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit 96T/48T
35644 大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒 Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISA Kit 96T/48T
35645 大鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 Rat 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit 96T/48T
35646 大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 Rat N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit 96T/48T
35647 大鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 Rat 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit 96T/48T
35648 大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒 Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRα ELISA Kit 96T/48T
35649 大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒 Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRβ ELISA Kit 96T/48T
35650 大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit 96T/48T
35651 大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 5,IL-5 ELISA Kit 96T/48T
35652 大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒 Rat Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA Kit 96T/48T
35653 大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒 Rat Leptin,LEP ELISA Kit 96T/48T
35654 大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 Rat leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit 96T/48T
35655 大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒 Rat L-Selectin ELISA Kit 96T/48T
35656 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 Rat monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA Kit 96T/48T
35657 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒 Rat monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA Kit 96T/48T
35658 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒 Rat monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA Kit 96T/48T
35659 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒 Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA Kit 96T/48T
35660 大鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒 Rat Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA Kit 96T/48T
35661 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit 96T/48T
35662 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 3β,MIP-3β ELISA Kit 96T/48T
35663 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA Kit 96T/48T
35664 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 10,MMP-10 ELISA Kit 96T/48T
35665 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA Kit 96T/48T
35666 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit 96T/48T
35667 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA Kit 96T/48T
35668 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA Kit 96T/48T
35669 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 ELISA Kit 96T/48T
35670 大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 Rat 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit 96T/48T
35671 大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒 Rat Osteoprotegerin,OPG ELISA Kit 96T/48T
35672 大鼠B因子(BF)ELISA試劑盒 Rat factor B,BF ELISA Kit 96T/48T
35673 大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 Rat Oncostatin-M,OSM ELISA Kit 96T/48T
35674 大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒 Rat placenta growth factor,PLGF ELISA Kit 96T/48T
35675 大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒 Rat regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA Kit 96T/48T
35676 大鼠L苯*解氨酶(PAL)ELISA試劑盒 Rat L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒96T/48T
35677 大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒 Rat Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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