人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35607 大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒 Rat Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit 96T/48T
35608 大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 Rat Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit 96T/48T
35609 大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 Rat intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit 96T/48T
35610 大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒 Rat intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit 96T/48T
35611 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 Rat plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit 96T/48T
35612 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒 Rat plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit 96T/48T
35613 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒 Rat Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 96T/48T
35614 大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 Rat thrombomodulin,TM ELISA Kit 96T/48T
35615 大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 Rat plaet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 96T/48T
35616 大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 96T/48T
35617 大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 Rat plaet activating factor,PAF ELISA Kit 96T/48T
35618 大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒 Rat procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA Kit 96T/48T
35619 大鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒 Rat Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
35620 大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 Rat C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit 96T/48T
35621 大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 Rat Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA Kit 96T/48T
35622 大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) ELISA試劑盒 Rat Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit 96T/48T
35623 大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒 Rat Tissue factor,TF ELISA Kit 96T/48T
35624 大鼠*(VD)ELISA試劑盒 Rat Vitamin D,VD ELISA Kit 96T/48T
35625 大鼠*1(VK1)ELISA試劑盒 Rat Vitamin K1,VK1 ELISA Kit 96T/48T
35626 大鼠*12(VB12)ELISA試劑盒 Rat Vitamin B12,VB12 ELISA Kit 96T/48T
35627 大鼠*3(VD3)ELISA試劑盒 Rat Vitamin D3,VD3 ELISA Kit 96T/48T
35628 大鼠*2(VD2)ELISA試劑盒 Rat Vitamin D2,VD2 ELISA Kit 96T/48T
35629 大鼠*(VE)ELISA試劑盒 Rat Vitamin E,VE ELISA Kit 96T/48T
35630 大鼠*(VA)ELISA試劑盒 Rat Vitamin A,VA ELISA Kit 96T/48T
35631 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 Rat β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit 96T/48T
35632 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 Rat Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 96T/48T
35633 大鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒 Rat Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit 96T/48T
35634 大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒 Rat connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit 96T/48T
35635 大鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒 Rat anti-sperm antibody,AsAb ELISA Kit 96T/48T
35636 大鼠甲狀旁腺激素(PTH) ELISA試劑盒 Rat Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit 96T/48T
35637 大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 Rat Histamine,HIS ELISA Kit 96T/48T
35638 大鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 13,IL-13 ELISA Kit 96T/48T
35639 大鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 15,IL-15 ELISA Kit 96T/48T
35640 大鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 16,IL-16 ELISA Kit 96T/48T
35641 大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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