人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
35571 大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒 Rat Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
35572 大鼠*(VC)ELISA試劑盒 Rat Vitamin C,VC ELISA Kit 96T/48T
35573 大鼠*6(VB6)ELISA試劑盒 Rat Vitamin B6,VB6 ELISA Kit 96T/48T
35574 大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
35575 大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒 Rat Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit 96T/48T
35576 大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒 Rat soluble P-selectin,sP-selectin ELISA Kit 96T/48T
35577 大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 Rat Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 96T/48T
35578 大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 Rat Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit 96T/48T
35579 大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 96T/48T
35580 大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit 96T/48T
35581 大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒 Rat Myoglobin,MYO/MB ELISA Kit 96T/48T
35582 大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit 96T/48T
35583 大鼠乙酰*(Ach)ELISA試劑盒 Rat acetylcholine,ACH ELISA Kit 96T/48T
35584 大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒 Rat thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA Kit 96T/48T
35585 大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 Rat Anti-thyroid-globulin antibody,ATGA/TGAB ELISA Kit 96T/48T
35586 大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒 Rat corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit 96T/48T
35587 大鼠*釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒 Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit 96T/48T
35588 大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 Rat Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit 96T/48T
35589 大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 Rat leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 96T/48T
35590 大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 Rat Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 96T/48T
35591 大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 Rat intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit 96T/48T
35592 大鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒 Rat omerase,TE ELISA Kit 96T/48T
35593 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit 96T/48T
35594 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit 96T/48T
35595 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit 96T/48T
35596 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit 96T/48T
35597 大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)ELISA試劑盒 Rat basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit 96T/48T
35598 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit 96T/48T
35599 大鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 Rat Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1,sICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
35600 大鼠可溶性血管細胞粘附分子1人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒(sVCAM-1)ELISA試劑盒 Rat soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
35601 大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 Rat Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 96T/48T
35602 大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 Rat Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T
35603 大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 Rat Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 96T/48T
35604 大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 Rat Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 96T/48T
35605 大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒 Rat Endostatin,ES ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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