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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-01 03:13:37瀏覽次數(shù):165次
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人端粒酶(TE)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人端粒酶(TE)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人端粒酶(TE)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35535 大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 Rat carbonic anhydrase,CA ELISA Kit 96T/48T
35536 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒 Rat calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit 96T/48T
35537 大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒 Rat Motilin,MTL ELISA Kit 96T/48T
35538 大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 Rat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
35539 大鼠*(SS)ELISA試劑盒 Rat Somatostatin,SS ELISA Kit 96T/48T
35540 大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 Rat Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 96T/48T
35541 大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒 Rat skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit 96T/48T
35542 大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒 Rat Myosin,MYS ELISA Kit 96T/48T
35543 大鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒 Rat Desmin,Des ELISA Kit 96T/48T
35544 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
35545 大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒 Rat GATA binding protein 4,GATA4 ELISA Kit 96T/48T
35546 大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 Rat interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit 96T/48T
35547 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit 96T/48T
35548 大鼠抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 Rat Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
35549 大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒 Rat neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit 96T/48T
35550 大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 Rat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
35551 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 Rat Gelsolin ELISA Kit 96T/48T
35552 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 96T/48T
35553 大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒 Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 96T/48T
35554 大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 Rat inhibin B,INH-B ELISA Kit 96T/48T
35555 大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 Rat Insulin Receptor β,ISR-β ELISA Kit 96T/48T
35556 大鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒 Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 96T/48T
35557 大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒 Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 96T/48T
35558 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 Rat soluble plaet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit 96T/48T
35559 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA試劑盒 Rat major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
35560 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒 Rat major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
35561 大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit 96T/48T
35562 大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T
35563 大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒 Rat ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit 96T/48T
35564 大鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA試劑盒 Rat Cholecystokinin,CCK ELISA Kit 96T/48T
35565 大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒 Rat brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISA Kit 96T/48T
35566 大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 Rat 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit 96T/48T
35567 大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 Rat apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 96T/48T
35568 大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒人端粒酶(TE)ELISA試劑盒 Rat apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 96T/48T
35569 大鼠25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人端粒酶(TE)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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