人一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35499 大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Rat Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T
35500 大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Rat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
35501 大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 90,hSP-90 ELISA Kit 96T/48T
35502 大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 70,hSP-70 ELISA Kit 96T/48T
35503 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 40,hSP-40 ELISA Kit 96T/48T
35504 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 20,hSP-20 ELISA Kit 96T/48T
35505 大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 Rat amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 96T/48T
35506 大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 Rat Cyclin-D3 ELISA Kit 96T/48T
35507 大鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 Rat Cyclin-D2 ELISA Kit 96T/48T
35508 大鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 Rat Cyclin-D1 ELISA Kit 96T/48T
35509 大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Rat myelin basic protein,MBP ELISA Kit 96T/48T
35510 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit 96T/48T
35511 大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 Rat Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA Kit 96T/48T
35512 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 Rat Free Prostate Specific Antigen,fPSA ELISA Kit 96T/48T
35513 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 Rat prostate specific antigen,PSA ELISA Kit 96T/48T
35514 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒 Rat ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit 96T/48T
35515 大鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒 Rat mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 96T/48T
35516 大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒 Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 96T/48T
35517 大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒 Rat heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit 96T/48T
35518 大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 Rat Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
35519 大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 Rat Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit 96T/48T
35520 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 5,AQP-5 ELISA Kit 96T/48T
35521 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 4,AQP-4 ELISA Kit 96T/48T
35522 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit 96T/48T
35523 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit 96T/48T
35524 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit 96T/48T
35525 大鼠水通道蛋白2(AQP-2) ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 2,AQP-2 ELISA Kit 96T/48T
35526 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒 Rat Thyroglobulin,TG ELISA Kit 96T/48T
35527 大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 Rat Inhibin,INH-A ELISA Kit 96T/48T
35528 大鼠絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒 Rat Chorionic Gonadotrophin β,β-CG ELISA Kit 96T/48T
35529 大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 Rat sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit 96T/48T
35530 大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒 Rat Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA Kit 人一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒96T/48T
35531 大鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒 Rat Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit 96T/48T
35532 大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 Rat High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 96T/48T
35533 大鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 Rat pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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