人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
35427 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 60,hSP-60 ELISA Kit 96T/48T
35428 大鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒 Rat malondialchehyche,MDA ELISA Kit 96T/48T
35429 大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 Rat Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit 96T/48T
35430 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 Rat Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit 96T/48T
35431 大鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 Rat 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 96T/48T
35432 大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 Rat soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA Kit 96T/48T
35433 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 Rat hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA Kit 96T/48T
35434 大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 Rat Amylin ELISA Kit 96T/48T
35435 大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒 Rat Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit 96T/48T
35436 大鼠*(Cyt-C)ELISA試劑盒 Rat Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit 96T/48T
35437 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
35438 大鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 Rat melanocyte antibody,MC Ab ELISA Kit 96T/48T
35439 大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 Rat dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA Kit 96T/48T
35440 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒 t Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit 96T/48T
35441 大鼠補體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒 Rat Complement fragment 5a,C5a ELISA Kit 96T/48T
35442 大鼠補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 Rat Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 96T/48T
35443 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒 Rat Follistatin,FS ELISA Kit 96T/48T
35444 大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒 Rat Histone Deacetylase,HD ELISA Kit 96T/48T
35445 大鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 Rat E-Selectin ELISA Kit 96T/48T
35446 大鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 Rat Methylase ELISA Kit 96T/48T
35447 大鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 Rat proliferating cell nuclear antigen antibody,PCNA ELISA Kit 96T/48T
35448 大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 Rat lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit 96T/48T
35449 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒 Rat tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP-5b ELISA Kit 96T/48T
35450 大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 Rat Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide,GIP ELISA Kit 96T/48T
35451 大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA Kit 96T/48T
35452 大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit 96T/48T
35453 大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit 96T/48T
35454 大鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒 Rat Thyroxine antibody,TAb ELISA Kit 96T/48T
35455 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒 Rat thyroid stimulating hormone receptor antidoby,TRAb ELISA Kit 96T/48T
35456 大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 Rat catecholamine,CA ELISA Kit 96T/48T
35457 大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 27,IL-27 ELISA Kit 96T/48T
35458 大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 23,IL-23 ELISA Kit 96T/48T
35459 大鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒 Rat cardiotrophln 1,CT-1 ELISA Kit 96T/48T
35460 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒 Rat anti-alpha-Fodrin IgG/IgA,α-Fodrin IgG/IgA人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 ELISA Kit 96T/48T
35461 大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 Rat lipoprotein α,Lp-α ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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