人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

35391 大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒 Rat anti-endothelial cell antibody,AECA ELISA Kit 96T/48T
35392 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 Rat intact Parathormone ,i-PTH ELISA Kit  96T/48T
35393 大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒 Rat Calf Intestine Alkaline Phosphatase,CIAP ELISA Kit 96T/48T
35394 大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 associated protein A,SP-A ELISA Kit 96T/48T
35395 大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒  Rat Clara cell protein,CC16 ELISA Kit  96T/48T
35396 大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 Rat Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit 96T/48T
35397 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒 Rat myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA Kit 96T/48T
35398 大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 Rat Complement 3,C3 ELISA Kit 96T/48T
35399 大鼠*(AZT)ELISA試劑盒 Rat Azidothymidine,AZT ELISA Kit 96T/48T
35400 大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒 Rat dopamine,DA ELISA Kit 96T/48T
35401 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒 Rat ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit 96T/48T
35402 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒 Rat Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit 96T/48T
35403 大鼠*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 Rat glutamic acid decarboxylase autoantibody,GAD-Ab ELISA Kit 96T/48T
35404 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP) ELISA試劑盒  Rat Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA Kit 96T/48T
35405 大鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒 Rat anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISA Kit 96T/48T
35406 大鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 rat anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit 96T/48T
35407 大鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒 Rat anti-cardiolipin antibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit 96T/48T
35408 大鼠apelin 12(AP12)ELISA試劑盒 Rat apelin 12,AP12 ELISA Kit 96T/48T
35409 大鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 Rat Interferon α,IFN-α ELISA Kit 96T/48T
35410 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒 Rat rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 96T/48T
35411 大鼠*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 Rat coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit 96T/48T
35412 大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒 Rat endotoxin,ET ELISA Kit 96T/48T
35413 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒 Rat Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit 96T/48T
35414 大鼠*A(CsA)ELISA試劑盒 Rat Cyclosporine A,CsA ELISA Kit 96T/48T
35415 大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 Rat high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 96T/48T
35416 大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒 Rat β2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M,β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit 96T/48T
35417 大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 Rat Endometrium Antibody,EMAb ELISA Kit 96T/48T
35418 大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒 Rat LDL-IC ELISA Kit 96T/48T
35419 大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 Rat 15-lipoxygenase,15-LO/LOX ELISA Kit 96T/48T
35420 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
35421 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit 96T/48T
35422 大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 Rat Haptoglobin,Hpt/HP ELISA Kit 96T/48T
35423 大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 Rat α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit 96T/48T
35424 大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 Rat Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit 96T/48T
35425 大鼠*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 Rat cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit 96T/48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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