人*(PP)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人*(PP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
35211 大鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒 Rat Triglyceride,TG ELISA Kit 96T/48T
35212 大鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒 Rat low density lipoprotein,LDL ELISA Kit 96T/48T
35213 大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒 Rat High density lipoprotein,HDL ELISA Kit 96T/48T
35214 大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒 Rat progesterone receptor,PGR ELISA Kit 96T/48T
35215 大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒 Rat Angiotensin Ⅱ converting enzyme,ACEⅡ ELISA Kit 96T/48T
35216 大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒 Rat Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ ELISA Kit 96T/48T
35217 大鼠*釋放激素受體(GnRHR)ELISA試劑盒 Rat Gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR ELISA Kit 96T/48T
35218 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 96T/48T
35219 大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein,HSP47 ELISA Kit 96T/48T
35220 大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)ELISA試劑盒 Rat glucocorticoid,GC ELISA Kit 96T/48T
35221 大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒 Rat Citrate synthase,CS ELISA Kit 96T/48T
35222 大鼠L-鼠乳酸脫氫酶(L-LDH) ELISA試劑盒 Rat L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA Kit 96T/48T
35223 大鼠脂酰*合成酶(ACS)ELISA試劑盒 Rat Fatty acyl-CoA synthetase,ACS ELISA Kit 96T/48T
35224 大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)ELISA試劑盒 Rat carnitine-acylcarnitine translocase,CACT ELISA Kit 96T/48T
35225 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒 Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA Kit 96T/48T
35226 大鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 Rat Metallothionein,MT ELISA Kit 96T/48T
35227 大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒 Rat cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA Kit 96T/48T
35228 大鼠乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒 Rat Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit 96T/48T
35229 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒 Rat carbohydrate-deficient transferrin,CDT ELISA Kit 96T/48T
35230 大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒 Rat Total bile acide,TBA ELISA Kit 96T/48T
35231 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 Rat β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA Kit 96T/48T
35232 大鼠*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 Rat Retinol-binding protein,RBP ELISA Kit 96T/48T
35233 大鼠*釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA試劑盒 Rat anti-gonadotropin-releasing hormone receptor antibody,GNRHR-Ab ELISA Kit 96T/48T
35234 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒 Rat von Willebrand Factor cleaving protease,ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit 96T/48T
35235 大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Rat major basic protein,MBP ELISA Kit 96T/48T
35236 大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 96T/48T
35237 大鼠鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒 Rat calcineurin,CaN ELISA Kit 96T/48T
35238 大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒 Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISA Kit 96T/48T
35239 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 Rat anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit 96T/48T
35240 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒 Rat apoptosis inducing factor,AIF ELISA Kit 96T/48T
35241 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒 Rat anti-double stranded DNA,dsDNA ELISA Kit 96T/48T
35242 大鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 Rat alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit 96T/48T
35243 大鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒 Rat Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA Kit 96T/48T
35244 大鼠脂多糖結(jié)合蛋白人*(PP)ELISA試劑盒(LBP)ELISA試劑盒 Rat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit 96T/48T
35245 大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒 Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人*(PP)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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