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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人*(LZM)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人*(LZM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人*(LZM)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35175 大鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒 Rat Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit 96T/48T
35176 大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA試劑盒 Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK ELISA Kit 96T/48T
35177 大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 Rat Methemoglobin,MHB ELISA Kit 96T/48T
35178 大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒 Rat diamine oxidase,DAO ELISA Kit 96T/48T
35179 大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒 Rat Melatonin,MT/MLT ELISA Kit 96T/48T
35180 大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF-10)ELISA試劑盒 Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 ELISA Kit 96T/48T
35181 大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒 Rat secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit 96T/48T
35182 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒 Rat Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 ELISA Kit 96T/48T
35183 大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒 Rat Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISA Kit 96T/48T
35184 大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒 Rat Troponin T,Tn-T ELISA Kit 96T/48T
35185 大鼠CD8分子(CD8)ELISA試劑盒 Rat cluster of differentiation 8,CD8 ELISA Kit 96T/48T
35186 大鼠表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 Rat epidermal growth factor receptor,EGFR ELISA Kit 96T/48T
35187 大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒 Rat soluble Interleukin 2 recepter,IL-2sR ELISA Kit 96T/48T
35188 大鼠軸突生長(zhǎng)誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒 Rat Netrin-1,Ntn1 ELISA Kit 96T/48T
35189 大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 Rat Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 96T/48T
35190 大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒 Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA Kit 96T/48T
35191 大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat C-opeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
35192 大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒 Rat phospho-inhibitory subunit of NF-κBα,pIKBα ELISA Kit 96T/48T
35193 大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit 96T/48T
35194 大鼠樹(shù)突狀細(xì)胞表面特異性C型凝集素-細(xì)胞間黏附分子3結(jié)合非整合素分子(DC-SIGN/CD209) Rat DC specific intercellular adhesion molecule 3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN/CD209 ELISA Kit 96T/48T
35195 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒 Rat procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit 96T/48T
35196 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 Rat A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit 96T/48T
35197 大鼠c-fos ELISA試劑盒 Rat c-fos ELISA Kit 96T/48T
35198 大鼠c-jun ELISA試劑盒 Rat c-jun ELISA Kit 96T/48T
35199 大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒 Rat soluble Interleukin 6 receptor,sIL-6R ELISA Kit 96T/48T
35200 大鼠吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒 Rat Pyridinoline,PYD ELISA Kit 96T/48T
35201 大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒 Rat beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA Kit 96T/48T
35202 大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒 Rat bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit 96T/48T
35203 大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒 Rat Clusterin,CLU ELISA Kit 96T/48T
35204 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒 Rat transforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA Kit 96T/48T
35205 大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 32,IL-32 ELISA Kit 96T/48T
35206 大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA Kit 96T/48T
35207 大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒人*(LZM)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 21,IL-21 ELISA Kit 96T/48T
35208 大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒 Rat D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit 96T/48T
35209 大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒 Rat thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人*(LZM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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