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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-04 16:34:03瀏覽次數(shù):166次
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人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
35067 小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒 Mouse alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit 96T/48T
35068 小鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 Mouse bradykinin,BK ELISA Kit 96T/48T
35069 小鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒 Mouse Proinsulin,PI ELISA Kit 96T/48T
35070 小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒 Mouse anti-IgE receptor antibody ELISA Kit 96T/48T
35071 小鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒 Mouse anti-IVIgG antibody ELISA Kit 96T/48T
35072 小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒 Mouse Anti-myocardial antibody,AMA ELISA Kit 96T/48T
35073 小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒 Mouse Ceruloplasmin,CP/CER ELISA Kit 96T/48T
35074 小鼠p53(p53)ELISA試劑盒 Mouse p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit 96T/48T
35075 小鼠環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)ELISA試劑盒 Mouse Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit 96T/48T
35076 小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒 Mouse nitric oxide synthase,NOS ELISA Kit 96T/48T
35077 小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 Mouse inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit 96T/48T
35078 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Mouse Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T
35079 小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 Mouse Histamine,HIS ELISA Kit 96T/48T
35080 小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
35081 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 90,Hsp-90 ELISA Kit 96T/48T
35082 小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA Kit 96T/48T
35083 小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 Mouse adiponectin,ADP ELISA Kit 96T/48T
35084 小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 40,Hsp-40 ELISA Kit 96T/48T
35085 小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 Mouse amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 96T/48T
35086 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 Mouse interleukin 8,IL-8 ELISA Kit 96T/48T
35087 小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D3 ELISA Kit 96T/48T
35088 小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D2 ELISA Kit 96T/48T
35089 小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒 Mouse estrogen,E ELISA Kit 96T/48T
35090 小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D1 ELISA Kit 96T/48T
35091 小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Mouse myelin basic protein,MBP ELISA Kit 96T/48T
35092 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 Mouse transforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit 96T/48T
35093 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit 96T/48T
35094 小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA Kit 96T/48T
35095 小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 Mouse prostate specific antigen,PSA ELISA Kit 96T/48T
35096 小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒 Mouse ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit 96T/48T
35097 小鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒 Mouse mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 96T/48T
35098 小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒 Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 96T/48T
35099 小鼠血紅素氧合酶1人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒(HO-1)ELISA試劑盒 Mouse heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit 96T/48T
35100 小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 Mouse Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
35101 小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 Mouse Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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