人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
34959 小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒 Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit 96T/48T
34960 小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA試劑盒 Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit 96T/48T
34961 小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒 Mouse 15-lipoxygenase,15-LO/LOX ELISA Kit 96T/48T
34962 小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 Mouse Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit 96T/48T
34963 小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 Mouse Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
34964 小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 Mouse Serum amyloid A,SAA ELISA Kit 96T/48T
34965 小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 Mouse anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA Kit 96T/48T
34966 小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 Mouse Haptoglobin,Hpt/HP ELISA Kit 96T/48T
34967 小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒 Mouse 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA Kit 96T/48T
34968 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 Mouse α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit 96T/48T
34969 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit 96T/48T
34970 小鼠*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 Mouse cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit 96T/48T
34971 小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 Mouse luteotropic hormone,LH ELISA Kit 96T/48T
34972 小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 Mouse angiotensinogen,aGT ELISA Kit 96T/48T
34973 小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 Mouse heat shock protein 60,hSP-60 ELISA Kit 96T/48T
34974 小鼠絨毛膜*(CG)ELISA試劑盒 Mouse Chorionic Gonadotrophin,CG ELISA Kit 96T/48T
34975 小鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒 Mouse malondialchehyche,MDA ELISA Kit 96T/48T
34976 小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 Mouse Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit 96T/48T
34977 小鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 Mouse C-Peptide ELISA Kit 96T/48T
34978 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit 96T/48T
34979 小鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 Mouse 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 96T/48T
34980 小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 Mouse soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA Kit 96T/48T
34981 小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒 Mouse Insulin,INS ELISA Kit 96T/48T
34982 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 Mouse hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA Kit 96T/48T
34983 小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒 Mouse Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit 96T/48T
34984 小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 Mouse Amylin ELISA Kit 96T/48T
34985 小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒 Mouse Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit 96T/48T
34986 小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒 Mouse Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit 96T/48T
34987 小鼠*(Cyt-C)ELISA試劑盒 Mouse Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit 96T/48T
34988 小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 Mouse Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit 96T/48T
34989 小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒 Mouse angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
34990 小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 Mouse melanocyte antibody,MC Ab ELISA Kit 96T/48T
34991 小鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 Mouse thyroxine,T4 ELISA Kit 96T/48T
34992 小鼠二肽基肽酶Ⅳ人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒(DPPⅣ)ELISA試劑盒 Mouse dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA Kit 96T/48T
34993 小鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒 Mouse Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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