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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
34853 小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 Mouse Hexokinase,HK ELISA Kit 96T/48T
34854 小鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1) ELISA試劑盒 Mouse pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISA Kit 96T/48T
34855 小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒 Mouse glycogen synthase kinase,GSK ELISA Kit 96T/48T
34856 小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 Mouse CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA Kit 96T/48T
34857 小鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒 Mouse Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 ELISA Kit 96T/48T
34858 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 Mouse B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit 96T/48T
34859 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒 Mouse CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 ELISA Kit 96T/48T
34860 小鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒 Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TGSF ELISA Kit 96T/48T
34861 小鼠羥*(Hyp)ELISA試劑盒 Mouse hydroxyproline,Hyp ELISA Kit 96T/48T
34862 小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒 Mouse Osteoprotegerin Ligand,OPGL ELISA Kit 96T/48T
34863 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 Mouse Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit 96T/48T
34864 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒 Mouse anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit 96T/48T
34865 小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒 Mouse ferritin,FE ELISA Kit 96T/48T
34866 小鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒 Mouse carbonic anhydrase 2,CA-2 ELISA Kit 96T/48T
34867 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 Mouse pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit 96T/48T
34868 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒 Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit 96T/48T
34869 小鼠抗*(AT)ELISA試劑盒 Mouse Anti-trypsin,AT ELISA Kit 96T/48T
34870 小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒 Mouse islet cell antibody,ICA ELISA Kit 96T/48T
34871 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 Mouse Kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit 96T/48T
34872 小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 Mouse anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit 96T/48T
34873 小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit 96T/48T
34874 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 Mouse Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA Kit 96T/48T
34875 小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30(M30)ELISA試劑盒 Mouse Embryonic Stem MESPU30,M30 ELISA Kit 96T/48T
34876 小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 Mouse nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit 96T/48T
34877 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 Mouse plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit 96T/48T
34878 小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 Mouse free fatty acids,FFA ELISA Kit 96T/48T
34879 小鼠血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒 Mouse thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 96T/48T
34880 小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 Mouse osteonectin,ON ELISA Kit 96T/48T
34881 小鼠*(FA)ELISA試劑盒 Mouse Folic acid,FA ELISA Kit 96T/48T
34882 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 Mouse histon-H2b ELISA Kit 96T/48T
34883 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
34884 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒 Mouse glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit 96T/48T
34885 小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒 Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit 96T/48T
34886 小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒 Mouse Neuroglobin,NGB ELISA Kit 96T/48T
34887 小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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