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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-23 23:47:48瀏覽次數(shù):186次
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人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
34709 小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA Kit 96T/48T
34710 小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒 Mouse β-catenin,β-cat ELISA Kit 96T/48T
34711 小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒 Mouse CTX-2 ELISA Kit 96T/48T
34712 小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒 Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit 96T/48T
34713 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit 96T/48T
34714 小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
34715 小鼠角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 96T/48T
34716 小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 Mouse Activin A,ACV-A ELISA Kit 96T/48T
34717 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit 96T/48T
34718 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit 96T/48T
34719 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit 96T/48T
34720 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA Kit 96T/48T
34721 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1δ,MIP-1δ ELISA Kit 96T/48T
34722 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit 96T/48T
34723 小鼠*(LZM)ELISA試劑盒 Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit 96T/48T
34724 小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA試劑盒 Mouse soluble cluster of differentiation 30,sCD30 ELISA Kit 96T/48T
34725 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒 Mouse soluble myosin heavy chain 2,sMHC-2 ELISA Kit 96T/48T
34726 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒 Mouse soluble myosin heavy chain 1,sMHC-1 ELISA Kit 96T/48T
34727 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) ELISA試劑盒 Mouse Mucin-5 subtype AC,MUC5AC ELISA Kit 96T/48T
34728 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit 96T/48T
34729 小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
34730 小鼠角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 96T/48T
34731 小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 Mouse Activin A,ACV-A ELISA Kit 96T/48T
34732 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 Mouse anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit 96T/48T
34733 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit 96T/48T
34734 小鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒 Mouse apoptosis inducing factor,AIF ELISA Kit 96T/48T
34735 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit 96T/48T
34736 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit 96T/48T
34737 小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit 96T/48T
34738 小鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 Mouse alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit 96T/48T
34739 小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒 Mouse Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA Kit 96T/48T
34740 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
34741 小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒 Mouse major histocompatibility complex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
34742 小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒 Mouse E-Cadherin,E-Cad ELISA Kit 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒96T/48T
34743 小鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒 Mouse Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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