人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
34637 人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)ELISA試劑盒 Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit 96T/48T
34638 人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA試劑盒 Human vitronectin,VNR ELISA Kit 96T/48T
34639 人波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒 Human vimentin,VIM ELISA Kit 96T/48T
34640 人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒 Human Surfactant Protein D,SP-D ELISA Kit 96T/48T
34641 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA試劑盒 Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit 96T/48T
34642 人N-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)ELISA試劑盒 Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 96T/48T
34643 人腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒 Human Neuroglobin,NGB ELISA Kit 96T/48T
34644 人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒 Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 96T/48T
34645 人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 96T/48T
34646 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit 96T/48T
34647 人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒 Human gelson ELISA Kit 96T/48T
34648 人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒 Human talin ELISA Kit 96T/48T
34649 人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 96T/48T
34650 小鼠FMS樣*激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒 Mouse FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISA Kit 96T/48T
34651 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒 Mouse glucoprotein 130,gp130 ELISA Kit 96T/48T
34652 小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒 Mouse intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
34653 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 Mouse Interferon γ ,IFN-γ ELISA KitKit 96T/48T
34654 小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit 96T/48T
34655 小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 13,IL-13 ELISA Kit 96T/48T
34656 小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit 96T/48T
34657 小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒 Mouse fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 96T/48T
34658 小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 Mouse Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit 96T/48T
34659 小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit 96T/48T
34660 小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 Mouse interleukin 10,IL-10 ELISA Kit 96T/48T
34661 小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 11,IL-11 ELISA Kit 96T/48T
34662 小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 15,IL-15 ELISA Kit 96T/48T
34663 小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 Mouse 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit 96T/48T
34664 小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 1α,IL-1α ELISA Kit 96T/48T
34665 小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit 96T/48T
34666 小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 96T/48T
34667 小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit 96T/48T
34668 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒 Mouse Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA Kit 96T/48T
34669 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒 Mouse Leptin,LEP ELISA Kit 96T/48T
34670 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 Mouse Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit 96T/48T
34671 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1β,MIP-1β ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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