人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質量。
34601 人基質γ羧基*蛋白(MGP)ELISA試劑盒 Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA Kit 96T/48T
34602 人基質裂解蛋白/基質溶素(MAT)ELISA試劑盒 Human matrilysin,MAT ELISA Kit 96T/48T
34603 人溶酶體相關膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒 Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Kit 96T/48T
34604 人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA試劑盒 Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit 96T/48T
34605 人不透光相關蛋白(OPAs)ELISA試劑盒 Human Opacity-associated proteins,OPAs ELISA Kit 96T/48T
34606 人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒 Human flagellin ELISA Kit 96T/48T
34607 人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒 Human Poly Serium Antigen,PHSA ELISA Kit 96T/48T
34608 人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA試劑盒 Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit 96T/48T
34609 人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA試劑盒 Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit 96T/48T
34610 人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit 96T/48T
34611 人類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒 Human orosomucoid,ORM ELISA Kit 96T/48T
34612 人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒 Human Elastin,ELN ELISA Kit 96T/48T
34613 人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒 Human Involucrin,iNV ELISA Kit 96T/48T
34614 人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA試劑盒 Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit 96T/48T
34615 人生長相關蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒 Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit 96T/48T
34616 人cAMP反應元件結合蛋白(CREB)ELISA試劑盒 Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit 96T/48T
34617 人聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒 Human Agrin ELISA Kit 96T/48T
34618 人Agouti相關蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit 96T/48T
34619 人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA試劑盒 Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit 96T/48T
34620 人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒 Human elongin A,EloA ELISA Kit 96T/48T
34621 人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA試劑盒 Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit 96T/48T
34622 人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 Human bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit 96T/48T
34623 人細胞外基質磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒 Human matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE ELISA Kit 96T/48T
34624 人復制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒 Human replication protein A,RPA-70 ELISA Kit 96T/48T
34625 人軟骨寡聚基質蛋白(COMP)ELISA試劑盒 Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA Kit 96T/48T
34626 人抗原提呈相關轉運蛋白/T細胞活化蛋白(TAP)ELISA試劑盒 Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit 96T/48T
34627 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA試劑盒 Human immunosuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit 96T/48T
34628 人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA試劑盒 Human Gliadin IgA ELISA Kit 96T/48T
34629 人發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒 Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 96T/48T
34630 人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒 Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit 96T/48T
34631 人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)ELISA試劑盒 Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit 96T/48T
34632 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒 Human mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit 96T/48T
34633 人核基質蛋白22(NMP-22)ELISA試劑盒 Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 96T/48T
34634 人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒 Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit 96T/48T
34635 人多藥耐藥相關蛋白(MRP)ELISA試劑盒 Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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