人*蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人*蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
34423 人抗巨細胞病毒抗體IgG(anti-CMV IgG)ELISA試劑盒 Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG ELISA Kit 96T/48T
34424 人妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit 96T/48T
34425 人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒 Human soluble human leucocyte antigen G1,sHLA-G ELISA Kit 96T/48T
34426 人補體因子D(CFD)ELISA試劑盒 Human complement factor D,CFD ELISA Kit 96T/48T
34427 人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒 Human Plasma fibronectin,pFN ELISA Kit 96T/48T
34428 人細胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒 Human cellular fibronectin,cFn ELISA Kit 96T/48T
34429 人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒 Human Total protein S,TPS ELISA Kit 96T/48T
34430 人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)ELISA試劑盒 human serum deprivation response,SDPR ELISA Kit 96T/48T
34431 人中性粒細胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒 Human neutrophil peptide 1-3,HNP1-3 ELISA Kit 96T/48T
34432 人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 96T/48T
34433 人血漿抗凝蛋白S(PS) ELISA試劑盒 Human plasma anticoagulant protein S,PS ELISA Kit 96T/48T
34434 人血漿抗凝蛋白C(PC) ELISA試劑盒 Human plasma anticoagulant protein C,PC ELISA Kit 96T/48T
34435 *G Fc片段(Fcγ)ELISA試劑盒 Human Fc region of immunoglobulin G,Fcγ ELISA Kit 96T/48T
34436 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)ELISA試劑盒 Human cyclophilin B,CyPB ELISA Kit 96T/48T
34437 人*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 Human coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit 96T/48T
34438 人*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 Human coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit 96T/48T
34439 人補體1q(C1q)ELISA試劑盒 Human Complement 1q,C1q ELISA Kit 96T/48T
34440 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒 Human plaet membrane glycoprotein Ⅳ,GP-Ⅳ ELISA Kit 96T/48T
34441 人*α1(Thymosin α1)ELISA試劑盒 Human Thymosin α1 ELISA Kit 96T/48T
34442 人補體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)ELISA試劑盒 Human complement control protein,CCP ELISA Kit 96T/48T
34443 人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒 Human plaet basic protein,PBP ELISA Kit 96T/48T
34444 人類白細胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒 Human leukocyte antigen C,HLA-C ELISA Kit 96T/48T
34445 人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA試劑盒 Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISA Kit 96T/48T
34446 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒 Human plasmin/fibrinolysin,PL/Fbn ELISA Kit 96T/48T
34447 人B細胞受體(BCR)ELISA試劑盒 Human B cell receptor,BCR ELISA Kit 96T/48T
34448 人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA試劑盒 Human membrane IgM,mIgM ELISA Kit 96T/48T
34449 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA試劑盒 Human membrane IgD,mIgD ELISA Kit 96T/48T
34450 人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒 Human killer cell immnoglobulin-like receptor,KIR ELISA Kit 96T/48T
34451 人殺傷細胞凝集素樣受體(KLR)ELISA試劑盒 Human killer cell lectin-like receptor,KLR ELISA Kit 96T/48T
34452 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒 Human Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL ELISA Kit 96T/48T
34453 人膜攻擊復(fù)合物(MAC)ELISA試劑盒人*蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒 Human membrane attack complex,MAC ELISA Kit 96T/48T
34454 人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒 Human EuglobulinLysis,EL ELISA Kit 96T/48T
34455 人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒 Human free haemoglobin,f-Hb ELISA Kit 96T/48T
34456 人*1(PRM1)ELISA試劑盒 Human Protamine 1,PRM1 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人*蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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