豬肝脂酶(LIPC)ELISA試劑盒發(fā)表的sci文章
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人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
34351 人孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒 Human orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit 96T/48T
34352 人基質(zhì)裂解素(ST1)ELISA試劑盒 Human Stromelysin-1,ST1 ELISA Kit 96T/48T
34353 人基質(zhì)裂解素(ST2)ELISA試劑盒 Human Stromelysin-2,ST2 ELISA Kit 96T/48T
34354 人基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒 Human Stromelysin-3,ST3 ELISA Kit 96T/48T
34355 人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒 Human Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit 96T/48T
34356 人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)ELISA試劑盒 Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody,PR3-ANCA ELISA Kit 96T/48T
34357 人β-促脂素(β-LPH)ELISA試劑盒 Human β-lipotropic hormone,β-LPH ELISA Kit 96T/48T
34358 人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒 Human lipoteichoic acids,LTA ELISA Kit 96T/48T
34359 人乙胺碘呋酮(AD)ELISA試劑盒 Human amiodarone,AD ELISA Kit 96T/48T
34360 人唾液酸(SA)ELISA試劑盒 Human Sialic acid,SA ELISA Kit 96T/48T
34361 人鞘磷脂(SM)ELISA試劑盒 Human sphingomyelin,SM ELISA Kit 96T/48T
34362 人尿游離*(UFC)ELISA試劑盒 Human urinary free cortisol,UFC ELISA Kit 96T/48T
34363 人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA試劑盒 Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA ELISA Kit 96T/48T
34364 人遲現(xiàn)抗原4(VLA4)ELISA試劑盒 Human very late appearing antigen 4,VLA4 ELISA Kit 96T/48T
34365 人吖啶橙(AO)ELISA試劑盒 Human Acrine Orange,AO ELISA Kit 96T/48T
34366 人甲胺喋呤(MTX)ELISA試劑盒 Human methotrexate,MTX ELISA Kit 96T/48T
34367 人對(duì)氨基苯甲酸(PABA)ELISA試劑盒 Human para-aminobenzoic acid,PABA ELISA Kit 96T/48T
34368 人苯*(LPA)ELISA試劑盒 Human L-phenylalanine,LPA ELISA Kit 96T/48T
34369 人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒 Human Immune RNA,Irna ELISA Kit 96T/48T
34370 人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA試劑盒 Human β-Lactamase inhibitors,BLI ELISA Kit 96T/48T
34371 人α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒 Human α-galactoyl,Gal ELISA Kit 96T/48T
34372 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒 Human αN-acetylglucosaminidase,αNAG ELISA Kit 96T/48T
34373 人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒 Human α2-plasmin inhititor,α2-PI ELISA Kit 96T/48T
34374 人*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 人高香草酸(HVA) ELISA Kit 96T/48T
34375 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA試劑盒 Human cadherln-related neuronal receptor1,CNR-1 ELISA Kit 96T/48T
34376 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒 Human Ataxia angiectasia mutated,ATM ELISA Kit 96T/48T
34377 人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒 Human aryl hydrocarbon receptor,AhR ELISA Kit 96T/48T
34378 人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒 Human Specifie Macrophage Arming Paetot,SMAF ELISA Kit 96T/48T
34379 人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒 Human maturation promoting factor,MF/MPF ELISA Kit 96T/48T
34380 人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒 Human activating transcription factor-1,ATF-1 ELISA Kit 96T/48T
34381 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒 Human antimous antibody,HAMA ELISA 96T/48T
34382 人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA試劑盒 Human voltage-gated calcium channel,VGCC ELISA Kit 96T/48T
34383 人溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒 Human Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA Kit 96T/48T
34384 人纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒 Human Fibroblast surface protein,FSP ELISA Kit 96T/48T
34385 人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA試劑盒 Human secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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