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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-12 15:45:03瀏覽次數(shù):192次
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人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
34279 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒 Human Cardiac myosin-light chains 1,CMLC-1 ELISA Kit 96T/48T
34280 人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒 Human Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA Kit 96T/48T
34281 人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒 Human 8-epi-prostaglandin F2alpha,8-epi-PGF2α ELISA Kit 96T/48T
34282 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒 Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex,VE-cad ELISA Kit 96T/48T
34283 人α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒 Human α-Smooth muscle actin,α-SMA ELISA Kit 96T/48T
34284 人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)ELISA試劑盒 Human α-sarcomeric actin,α-SCA ELISA Kit 96T/48T
34285 人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒 Human smooth muscle Myosin,SMM ELISA Kit 96T/48T
34286 人心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒 Human cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA Kit 96T/48T
34287 人肌球蛋白重鏈(MHC)ELISA試劑盒 Human myosin heavy chain,MHC ELISA Kit 96T/48T
34288 人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 Human Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit 96T/48T
34289 人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒 Human cardiotrophln 1,CT-1 ELISA Kit 96T/48T
34290 人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒 Human Ceruloplasmin,CP/CER ELISA Kit 96T/48T
34291 人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒 Human Gelsolin,GS ELISA Kit 96T/48T
34292 人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶1(Tie1)ELISA試劑盒 Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1,Tie1 ELISA Kit 96T/48T
34293 人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 Human Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit 96T/48T
34294 人血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit 96T/48T
34295 人帕金森氏病2Parkin(Park2)ELISA試劑盒 Human Parkinson disease 2 parkin,Park2 ELISA Kit 96T/48T
34296 人紐蛋白(VCL)ELISA試劑盒 Human vinculin,VCL ELISA Kit 96T/48T
34297 人軸突生長誘向因子4(Ntn4)ELISA試劑盒 Human Netrin-4,Ntn4 ELISA Kit 96T/48T
34298 人軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒 Human Netrin-1,Ntn1 ELISA Kit 96T/48T
34299 人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒 Human regenerating gene Ⅳ,REG-4 ELISA Kit 96T/48T
34300 人多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試劑盒 human versican/PG-M/PG-350,VS ELISA Kit 96T/48T
34301 人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA試劑盒 human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon,Nfkbie 96T/48T
34302 人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)ELISA試劑盒 human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4,ADAMTS4 ELISA Kit 96T/48T
34303 人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA Kit 96T/48T
34304 人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)ELISA試劑盒 human progestin and adipoQ receptor family member Ⅶ,PAQR7 ELISA Kit 96T/48T
34305 人*蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒 human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G,Serpina3g ELISA Kit 96T/48T
34306 人類似RIKEN cDNA A630077B13 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA A630077B13 gene ELISA Kit 96T/48T
34307 人類似RIKEN cDNA 3110050K21 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA Kit 96T/48T
34308 人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit 96T/48T
34309 人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA Kit 96T/48T
34310 人ras同源物基因家族成員b(RHOB)ELISA試劑盒 human ras homolog gene family,memmber B,RHOB ELISA Kit 96T/48T
34311 人假定蛋白LOC677340 ELISA試劑盒人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 human hypothetical protein LOC677340 ELISA Kit 96T/48T
34312 人假定蛋白LOC433328 ELISA試劑盒 human hypothetical protein LOC433328 ELISA Kit 96T/48T
34313 人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88(MYD88)ELISA試劑盒 human myeloid differentiation primary response gene 88,MYD88 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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