人組銨(HIS)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人組銨(HIS)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
34099 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒 Human thymidinephosphorylase,TP ELISA Kit 96T/48T
34100 人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒 Human Poly ADP ribose polymerase,PARP ELISA Kit 96T/48T
34101 人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 Human glucokinase,GCK ELISA Kit 96T/48T
34102 人單胺氧化酶(MAO)ELISA試劑盒 Human monoamine oxidase,MAO ELISA Kit 96T/48T
34103 人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒 Human cytosolic phospholipase A2,cPLA2 ELISA Kit 96T/48T
34104 人二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒 Human diamine oxidase,DAO ELISA Kit 96T/48T
34105 人環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒 Human cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA Kit 96T/48T
34106 人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒 Human Cyclin Dependent Kinase 5,CDK5 ELISA Kit 96T/48T
34107 人*10(KLK 10)ELISA試劑盒 Human Kallikrein 10,KLK 10 ELISA Kit 96T/48T
34108 人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒 Human Phospholipase Cγ1,PLCγ1 ELISA Kit 96T/48T
34109 人神經(jīng)氨酸酶(NA)ELISA試劑盒 Human neuraminidase,NA ELISA Kit 96T/48T
34110 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒 Human phosphoinositide-specific phospholipase C,PIPLC ELISA Kit 96T/48T
34111 人*激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒 Human tyrosine kinase2,Tyk-2 ELISA Kit 96T/48T
34112 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA試劑盒 Human Interleukin 1β converting enzyme,ICE ELISA Kit 96T/48T
34113 人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒 Human integrin-linked kinase 1,ILK-1 ELISA Kit 96T/48T
34114 人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA試劑盒 Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21B ELISA Kit 96T/48T
34115 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒 Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21A ELISA Kit 96T/48T
34116 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒 Human terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT ELISA Kit 96T/48T
34117 人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒 Human indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO ELISA Kit 96T/48T
34118 人脾臟*激酶(Syk)ELISA試劑盒 Human spleen tyrosine kinase,Syk ELISA Kit 96T/48T
34119 人*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 Human serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit 96T/48T
34120 人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒 Human interleukin receptor associated kinase,IRAK ELISA Kit 96T/48T
34121 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒 Human phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISA Kit 96T/48T
34122 人*(trypsin)ELISA試劑盒 Human trypsin ELISA Kit 96T/48T
34123 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）ELISA試劑盒 Human β-site APP-Cleaving Enzyme 1，1BACE1 ELISA Kit 96T/48T
34124 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA試劑盒 Human Protein disulfide-isomerase precursor,PDI ELISA Kit 96T/48T
34125 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒 Human protein disulfide-isomerase A3,PDIA3 ELISA Kit 96T/48T
34126 人*脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒 Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit 96T/48T
34127 人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒 Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase,PPI ELISA Kit 96T/48T
34128 人*氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒 Human ornithine carbamoyl transferase,OCT ELISA Kit 96T/48T
34129 人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒 Human Visceral adipose-specific serine protease人組銨(HIS)ELISA試劑盒 inhibitor,vaspin ELISA Kit 96T/48T
34130 人蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒 Human Protein Phosphatase,PP ELISA Kit 96T/48T
34131 人硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒 Human thioredoxin reductase,TrxR ELISA Kit 96T/48T
34132 人天青殺素(AZU)ELISA試劑盒 Human azurocidin,AZU ELISA Kit 96T/48T
34133 人血管緊張肽酶A(ATA)ELISA試劑盒 Human Angiotensinase A,ATA ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人組銨(HIS)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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