elisa檢測,BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白試劑盒
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-06 03:15:57瀏覽次數(shù):114次
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人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
34027 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒 Human 1,5-anhydroglucitol,1,5-AG ELISA Kit 96T/48T
34028 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒 Human N-MID Osteocalcin,N-MID-OT ELISA Kit 96T/48T
34029 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)ELISA試劑盒 Human low-density lipoprotein-receptor-related protein,LRP-6 ELISA Kit 96T/48T
34030 人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒 Human very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISA Kit 96T/48T
34031 人低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA試劑盒 Human very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISA Kit 96T/48T
34032 人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒 Human Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit 96T/48T
34033 人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 Human glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit 96T/48T
34034 人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒 Human 15-lipoxygenase,15-LO/LOX ELISA Kit 96T/48T
34035 人*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 Human glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit 96T/48T
34036 人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 Human Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA Kit 96T/48T
34037 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒 Human Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit 96T/48T
34038 人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒 Human Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit 96T/48T
34039 人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 Human pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA Kit 96T/48T
34040 人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 Human Osteopontin,OPN ELISA Kit 96T/48T
34041 人γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒 Human Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit 96T/48T
34042 人P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒 Human substance P receptor,SP-R ELISA Kit 96T/48T
34043 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Human lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
34044 人內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒 Human Endothelial lipase,EL ELISA Kit 96T/48T
34045 人橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒 Human skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit 96T/48T
34046 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 Human Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit 96T/48T
34047 人25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 Human 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 96T/48T
34048 人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒 Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit 96T/48T
34049 人骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit 96T/48T
34050 人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒 Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit 96T/48T
34051 人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒 Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 ELISA Kit 96T/48T
34052 人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 Human histon-H2b ELISA Kit 96T/48T
34053 人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 Human Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
34054 人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒 Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit 96T/48T
34055 人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 Human Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Ki 96T/48T
34056 人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)*蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒 Human mannan binding lectin associated serine protease,MASP ELISA Kit 96T/48T
34057 人周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISA試劑盒 Human Cyclin-dependent kinase 7,CDK-7 ELISA Kit 96T/48T
34058 人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒 Human Cyclin-dependent kinase 2,CDK-2 ELISA Kit 96T/48T
34059 人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒 Human Cyclin-dependent kinase 1,CDK-1 ELISA Kit 人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒96T/48T
34060 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 96T/48T
34061 人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 Human A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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