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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-01 22:26:41瀏覽次數(shù):123次
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人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
33955 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA試劑盒 Human Ultra Sensitive Prostate Specific Antigen,PSA U S ELISA Kit 96T/48T
33956 人*/苯丙酸去*(NP)ELISA試劑盒 Human Nandrolone Phenylpropionate,NP ELISA Kit 96T/48T
33957 人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒 Human 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA Kit 96T/48T
33958 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA Kit 96T/48T
33959 人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA Kit 96T/48T
33960 人半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 Human Cystatin C,Cys-C ELISA Kit 96T/48T
33961 人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 Human sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit 96T/48T
33962 人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒 Human Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA Kit 96T/48T
33963 人脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒 Human Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit 96T/48T
33964 人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒 Human calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit 96T/48T
33965 人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 Human 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit 96T/48T
33966 人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒 Human Big Endothelin,Big ET ELISA Kit 96T/48T
33967 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 Human intact Parathormone ,i-PTH ELISA Kit 96T/48T
33968 人游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒 Human Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit 96T/48T
33969 人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒 Human Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit 96T/48T
33970 人絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒 Human Chorionic Gonadotrophin β,β-CG ELISA Kit 96T/48T
33971 人*龍(PS)ELISA試劑盒 Human Prednisolone,PS ELISA Kit 96T/48T
33972 人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒 Human Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA Kit 96T/48T
33973 人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒 Human Erythropoietin receptor,EPOR ELISA Kit 96T/48T
33974 人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒 human β-tubulin,TUBB ELISA Kit 96T/48T
33975 人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒 Human total prostate s pecific antigen,tPSA ELISA Kit 96T/48T
33976 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒 Human Ureaplasma urealyticum antibody,UU-Ab ELISA Kit 96T/48T
33977 人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒 Human complex edprostate specific antigen,cPSA ELISA Kit 96T/48T
33978 人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒 Human Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit 96T/48T
33979 人*ELISA試劑盒 Human bacterial vaginosis,BV ELISA Kit 96T/48T
33980 人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠAb)ELISA試劑盒 Human Herpes simplexvirusⅠantibody,HSVⅠAb ELISA Kit 96T/48T
33981 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 ELISA試劑盒 Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit 96T/48T
33982 人乳頭狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒 Human papillomavirus IgM,HPV-IgM ELISA Kit 96T/48T
33983 人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 human papillomavirus IgG,HPV-IgG ELISA Kit 96T/48T
33984 人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒 Human Herpes simplex virus 2,HSV-Ag2 ELISA Kit 96T/48T
33985 人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 Human Free Prostate Specific Antigen,fPSA ELISA Kit 96T/48T
33986 人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 Human prostate specific antigen,PSA ELISA Kit 96T/48T
33987 人磷脂酰*(PS)ELISA試劑盒 Human phosphatidylserine,PS ELISA Kit 96T/48T
33988 人*磷酸甘油酯人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒(PC/CPG)ELISA試劑盒 Human choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISA Kit 96T/48T
33989 人總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒 Human Total bile acide,TBA ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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