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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-23 23:53:21瀏覽次數(shù):164次
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人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
33811 人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 Human Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit 96T/48T
33812 人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒 Human anti-liver cytosolantibody type 1,LC1 ELISA Kit 96T/48T
33813 人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA試劑盒 Human alveoli basement membrane zone antibody,ABM-Ab ELISA Kit 96T/48T
33814 人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒 Human anti-thymocyte globulin,ATG ELISA Kit 96T/48T
33815 人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒 Human epidermal basement membrane zone,EBMZ ELISA Kit 96T/48T
33816 人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA試劑盒 Human purkinje cell autoantibody,PCA-1/Yo ELISA Kit 96T/48T
33817 人抗Sa抗體(anti-Sa-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-Sa-antibody ELISA Kit 96T/48T
33818 人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒 Human neuronal nuclear autoantibody,ANNA-2/Ri ELISA Kit 96T/48T
33819 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒 Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody,hnRNP/RA33 ELISA Kit 96T/48T
33820 人抗Q熱抗體(anti-Q-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-Q fever antibody,anti-Q-Ab ELISA Kit 96T/48T
33821 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)ELISA試劑盒 Human polymyositis-sclerosis antibody,PM-Scl/PM-1 ELISA Kit 96T/48T
33822 人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA試劑盒 Human anti-PL7-antibody ELISA Kit 96T/48T
33823 人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒 Human anti-PL12-antibody,PL12/AlaRS ELISA Kit 96T/48T
33824 人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-Mi2-antibody ELISA Kit 96T/48T
33825 人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-Ku-antibody ELISA Kit 96T/48T
33826 人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-IgA antibody ELISA Kit 96T/48T
33827 人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒 Human neuronal nuclear autoantibody,ANNA-1/Hu ELISA Kit 96T/48T
33828 人抗DNA酶B抗體(anti-DNase B)ELISA試劑盒 Human anti-deoxyribonuclease B,anti-DNase B ELISA Kit 96T/48T
33829 人抗BP180抗體(BP180-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-Bullous Pemphigoid 180 antibody,BP180-Ab ELISA Kit 96T/48T
33830 人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-B burgdorleri antibody,BB-Ab ELISA Kit 96T/48T
33831 人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 Human Anti-smooth muscle antibody,ASMA ELISA Kit 96T/48T
33832 人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒 Human anti-liver cell membrane antibody,LMA ELISA Kit 96T/48T
33833 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒 Human liver specific lipoprotein,LSP ELISA Kit 96T/48T
33834 人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒 Human eye muscle antibody,EMAb ELISA Kit 96T/48T
33835 人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 Human Anti-Complement 1q antibody,C1q ELISA Kit 96T/48T
33836 人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒 Human intrinsic factor antibody,IFA ELISA Kit 96T/48T
33837 人抗磷脂抗體(Apl/APA)ELISA試劑盒 Human anti-phospholipid antibody,Apl/APA ELISA Kit 96T/48T
33838 人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒 Human anti-Histone antibody,AHA ELISA Kit 96T/48T
33839 人晶體蛋白α(Cryα)ELISA試劑盒 Human crystal proteins α,Cryα ELISA Kit 96T/48T
33840 人晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒 Human crystal proteins β,Cryβ ELISA Kit 96T/48T
33841 人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA試劑盒 Human Collagen autoantibody,CLA ELISA Kit 96T/48T
33842 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒 Human anti-filaggrin antibody,AFA ELISA Kit 96T/48T
33843 人抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒 Human Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit 96T/48T
33844 人抗肝腎微粒體抗體人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒(LKM)ELISA試劑盒 Human liver kidney microsome autoantibody,LKM ELISA Kit 96T/48T
33845 人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒 Human InterferonαAntibody,IFNα-Ab ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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