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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
33775 人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒 Human anti-Survivin antibody,Surv ELISA Kit 96T/48T
33776 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISA試劑盒 Human anti-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor antibody,GM-CSF Ab ELISA Kit 96T/48T
33777 人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA試劑盒 Human Anti-titin Antibody,TTN ELISA Kit 96T/48T
33778 人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA試劑盒 Human anti-presynaptic membrane antibody,PsmAb ELISA Kit 96T/48T
33779 人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒 Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2 antibody,AT2R-Ab ELISA Kit 96T/48T
33780 人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA試劑盒 Human angiotension Ⅱ receptor 1 Antibody,ATⅡR1 Ab ELISA Kit 96T/48T
33781 人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒 Human angiotension I receptor Antibody,ANG-ⅠR antibody ELISA Kit 96T/48T
33782 人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒 Human anti-calmodulin specific antibody,CaM-ab ELISA Kit 96T/48T
33783 人甲狀腺非肽激素抗體(THAA)ELISA試劑盒 Human thyroid hormone autoantibodies,THAA ELISA Kit 96T/48T
33784 人抗類(lèi)固醇生成細(xì)胞抗體(SCA)ELISA試劑盒 Human steroid producing cell autoantibody,SCA ELISA Kit 96T/48T
33785 人抗信號(hào)識(shí)別顆??贵w(SRP)ELISA試劑盒 Human signal recognization particle antibody,SRP ELISA Kit 96T/48T
33786 人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 Human anti-cell membrane DNA antibody,cmDNA ELISA Kit 96T/48T
33787 人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA試劑盒 Human autoantibodies against the C-terminal domain Ⅳ,ACAST-DⅣ ELISA Kit 96T/48T
33788 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒 Human anti-fibrillarin antibody,AFA/snoRNP/U3RNP ELISA Kit 96T/48T
33789 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA試劑盒 Human systemic lupus erythematosus,SLE ELISA Kit 96T/48T
33790 人抗*抗體(GM1)ELISA試劑盒 Human anti-ganglioside antibody,GM1 ELISA Kit 96T/48T
33791 人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒 Human anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA Kit 96T/48T
33792 人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA試劑盒 Human anti-neutrophil antibody,ANA ELISA Kit 96T/48T
33793 人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒 Human anti-gastric parietal cell antibody,AGPA/PCA ELISA Kit 96T/48T
33794 人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒 Human anti-Reticulin antibody,ARA ELISA Kit 96T/48T
33795 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒 Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit 96T/48T
33796 人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒 Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit 96T/48T
33797 人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA試劑盒 Human anti-parotid duct antibody ELISA Kit 96T/48T
33798 人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-cartilage-antibody ELISA Kit 96T/48T
33799 人抗人絨毛膜*抗體(AhCGAb)ELISA試劑盒 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit 96T/48T
33800 人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit 96T/48T
33801 人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒 Human anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit 96T/48T
33802 人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒 Human anti-gliadin antibody,AGA ELISA Kit 96T/48T
33803 人抗磷脂酰*抗體(APSA)ELISA試劑盒 Human Anti-phosphatidyl serine antibody,APSA ELISA Kit 96T/48T
33804 人抗磷壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒 Human anti-teichoic acid antibody,TA ELISA Kit 96T/48T
33805 人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒 Human anti-lymphocytotoxic antibody,ALA/LCA ELISA Kit 96T/48T
33806 人抗巨噬細(xì)胞抗體(anti-macrophage Ab)ELISA試劑盒 Human anti-macrophage antibody ELISA Kit 人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒96T/48T
33807 人抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit 96T/48T
33808 人抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 Human anti-red cell antibody ELISA Kit 96T/48T
33809 人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA試劑盒 Human 28S ribosome RNP antibody,28S rRNP ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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