人內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

33559 人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 Human Soluble protein-100B，S-100B ELISA Kit 96T/48T
33560 人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 human Beta-Endorphin，β-EP ELISA Kit 96T/48T
33561 人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA試劑盒  Human protocadherin 1,PCDH1 ELISA Kit 96T/48T
33562 人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒 Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK ELISA Kit 96T/48T
33563 人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒 Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA Kit 96T/48T
33564 人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒  Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1 ELISA Kit 96T/48T
33565 人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒  Human connective tissue-activating peptide Ⅲ,CTAPⅢ ELISA Kit 96T/48T
33566 *A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒  Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin A,FcαRⅠ ELISA Kit 96T/48T
33567 *E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒  Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin E,FcεRⅡ ELISA Kit 96T/48T
33568 *G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒  Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA Kit 96T/48T
33569 *G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒  Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit 96T/48T
33570 *G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒  Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit  96T/48T
33571 人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒 Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2 ELISA Kit  96T/48T
33572 人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒 Human Interferon ω,IFN-ω ELISA Kit 96T/48T
33573 人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒  Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,GlyCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
33574 人干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA試劑盒  Human interferon Regulatory Factor,IRF ELISA Kit 96T/48T
33575 人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒  Human lymphotoxinβ,LTB ELISA Kit 96T/48T
33576 人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒  Human lymphotoxinα,LTA ELISA Kit 96T/48T
33577 人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒 Human CC-chemokine receptor 1,CCR1 ELISA Kit 96T/48T
33578 人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒 Human CX3C-chemokine receptor 1,CX3CR1 ELISA Kit 96T/48T
33579 人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒  Human pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit 96T/48T
33580 人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒 Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
33581 人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒 Human Soluble Cluster of differentiation 38,sCD38 ELISA Kit 96T/48T
33582 人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒  Human Soluble Cluster of differentiation 21,sCD21 ELISA Kit 96T/48T
33583 人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 Human Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit 96T/48T
33584 人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒 Human Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit 96T/48T
33585 人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒  Human monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit  96T/48T
33586 人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒  Human Neural-Cadherin, N-Cad ELISA Kit 96T/48T
33587 人肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒 Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA Kit 96T/48T
33588 人紅細(xì)胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒  Human erythropoiesis stimulating factor,ESF ELISA Kit 96T/48T
33589 人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA試劑盒  Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISA Kit 96T/48T
33590 人上皮細(xì)胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒  Human Epithelial Cell Adhesion Molecule,Ep-CAM ELISA Kit 96T/48T
33591 人巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA Kit 96T/48T
33592 人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 Human soluble vascular 人內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit 96T/48T
33593 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒 Human thymic stromal lymphopoietin,TSLP ELISA Kit 96T/48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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