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人組織蛋白酶K（cath-K）ELISA試劑盒

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人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

32939 墨旱蓮對(duì)照藥材 1g
32940 牛蒡子對(duì)照藥材 1g
32941 牛膝對(duì)照藥材 1g
32942 南五味子對(duì)照藥材 1g
32943 平貝母對(duì)照藥材 1g
32944 枇杷葉對(duì)照藥材 1g
32945 佩蘭對(duì)照藥材 1g
32946 蒲公英 1g
32947 千里光對(duì)照藥材 1g
32948 千年健對(duì)照藥材 1g
32949 芡實(shí)對(duì)照藥材 1g
32950 茜草對(duì)照藥材 1g
32951 瞿麥對(duì)照藥材 1g
32952 青蒿對(duì)照藥材 1g
32953 人參對(duì)照藥材 1g
32954 肉豆蔻對(duì)照藥材 1g
32955 忍冬藤對(duì)照藥材 1g
32956 三棱對(duì)照藥材 1g
32957 山藥對(duì)照藥材 1g
32958 水蛭對(duì)照藥材 1g
32959 石菖蒲對(duì)照藥材 1g
32960 蘇木對(duì)照藥材 1g
32961 伸筋草對(duì)照藥材 1g
32962 沙苑子對(duì)照藥材 1g
32963 首烏藤對(duì)照藥材 1g
32964 射干對(duì)照藥材 1g
32965 桑葉對(duì)照藥材 1g
32966 桑白皮對(duì)照藥材 1g
32967 蛇床子對(duì)照藥材 1g
32968 酸棗仁對(duì)照藥材 1g
32969 升麻對(duì)照藥材 1g
32970 土鱉蟲對(duì)照藥材 1g
32971 天花粉對(duì)照藥材 1g
32972 太子參對(duì)照藥材 1g
32973 菟絲子對(duì)照藥材 1g
32974 透骨草對(duì)照藥材 1g
32975 天麻 1g
32976 王不留行對(duì)照藥材 1g
32977 五味子（北五味子）對(duì)照藥材 1g
32978 *對(duì)照藥材 1g
32979 五靈脂 1g
32980 仙鶴草對(duì)照藥材 1g
32981 玄參對(duì)照藥材 1g
32982 細(xì)辛對(duì)照藥材 1g
32983 徐長(zhǎng)卿對(duì)照藥材 1g
32984 旋復(fù)花對(duì)照藥材 1g
32985 續(xù)斷對(duì)照藥材 1g
32986 薤白對(duì)照藥材 1g
32987 郁金對(duì)照藥材 1g
32988 野菊花對(duì)照藥材 1g
32989 薏苡仁對(duì)照藥材 1g
32990 玉米須 1g
32991 茵陳 1g
32992 皂角刺對(duì)照藥材 1g
32993 人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒梔子對(duì)照藥材 1g
32994 紫花地丁對(duì)照藥材 1g
32995 紫蘇子對(duì)照藥材 1g
32996 紫草對(duì)照藥材 1g
32997 紫菀 1g
32998 澤瀉 1g

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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