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人17羥皮質(zhì)類固醇（17-OHCS）ELISA試劑盒

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更新時(shí)間：2017-01-17 15:37:12瀏覽次數(shù)：124次

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人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

32877 蒼術(shù) 1g
32878 大棗對(duì)照藥材 1g
32879 大黃對(duì)照藥材 1g
32880 大薊對(duì)照藥材 1g
32881 大血藤對(duì)照藥材 1g
32882 地骨皮對(duì)照藥材 1g
32883 當(dāng)歸對(duì)照藥材 1g
32884 獨(dú)活對(duì)照藥材 1g
32885 丹參 1g
32886 黨參對(duì)照藥材 1g
32887 淡豆豉對(duì)照藥材 1g
32888 鵝不食草對(duì)照藥材 1g
32889 防風(fēng)對(duì)照藥材 1g
32890 佛手對(duì)照藥材 1g
32891 茯苓對(duì)照藥材 1g
32892 粉萆薢對(duì)照藥材 1g
32893 番瀉葉對(duì)照藥材 1g
32894 龜甲對(duì)照藥材 1g
32895 干姜對(duì)照藥材 1g
32896 廣金錢(qián)草對(duì)照藥材 1g
32897 甘松對(duì)照藥材 1g
32898 甘草對(duì)照藥材 1g
32899 甘遂對(duì)照藥材 1g
32900 瓜蔞皮對(duì)照藥材 1g
32901 狗脊對(duì)照藥材 1g
32902 枸杞子對(duì)照藥材 1g
32903 高良姜對(duì)照藥材 1g
32904 葛根對(duì)照藥材 1g
32905 藁本對(duì)照藥材 1g
32906 桂皮對(duì)照藥材 1g
32907 桂枝對(duì)照藥材 1g
32908 黃柏對(duì)照藥材 1g
32909 海風(fēng)藤對(duì)照藥材 1g
32910 黃芪對(duì)照藥材 1g
32911 黃連對(duì)照藥材 1g
32912 黃精對(duì)照藥材 1g
32913 回心草對(duì)照藥材 1g
32914 何首烏對(duì)照藥材 1g
32915 紅花對(duì)照藥材 1g
32916 黃附片 1g
32917 九香蟲(chóng)對(duì)照藥材 1g
32918 金蕎麥對(duì)照藥材 1g
32919 荊芥對(duì)照藥材 1g
32920 桔梗對(duì)照藥材 1g
32921 菊花對(duì)照藥材 1g
32922 蒺藜對(duì)照藥材 1g
32923 決明子 1g
32924 苦楝皮對(duì)照藥材 1g
32925 款冬花對(duì)照藥材 1g
32926 蘆根對(duì)照藥材 1g
32927 連翹對(duì)照藥材 1g
32928 萊菔子對(duì)照藥材 1g
32929 鹿銜草對(duì)照藥材 1g
32930 羅布麻 1g
32931 馬兜鈴對(duì)照藥材 1g
32932 木瓜對(duì)照藥材 1g
32933 人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒麥冬對(duì)照藥材 1g
32934 麥芽對(duì)照藥材 1g
32935 沒(méi)藥對(duì)照藥材 1g
32936 麻黃根對(duì)照藥材 1g

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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