人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

32631 遠志山酮Ⅲ polygalaxanthone III C25H28O15 568.39 20mg
32632 遠志酸 Polygalacic acid 22338-71-2 C30H48O6 504.7 20mg
32633 香蘭素 Vanillin 121-33-5 C8H8O3 152.15 20mg
32634 異香蘭素 Isovanillin 621-59-0 C8H8O3 152.15 20mg
32635 仙鶴草酚B Agrimol B 55576-66-4 20mg
32636 細辛脂素 (-)-asarinin 133-04-0 C20H18O6 354.356 20mg
32637 小豆蔻明 Cardamonin 19309-14-9 C16H14O4 270.28 20mg
32638 辛夷脂素 Fargesin 31008-19-2 C21H22O6 370.4 20mg
32639 仙茅苷 85643-19-2 C22H26O11 466.44 20mg
32640 血根堿 Sanguinarine 2447-54-3 C20H14NO4+ 332.33 20mg
32641 柚皮甙二氫查爾酮 Naringin dihydrochalcone 18916-17-1 C27H34O14 582.55 20mg
32642 柚皮苷 Naringin  10236-47-2 C27H32O14 580.53 20mg
32643 蕓香柚皮苷 Narirutin 14259-46-2 C27H32O14 580.53 20mg
32644 柚皮素 Naringenin 480-41-1 C15H12O5 272.25 20mg
32645 柚皮素-7-O-葡萄糖醛酸苷 Naringenin-7-O-glucuronide
C21H20O11
448.28
10mg
32646 小白菊內(nèi)酯 Parthenolide 20554-84-1 C15H20O3 248.32 20mg
32647 夏佛塔苷 Schaftoside 51938-32-0 C26H28O14 564.49 20mg
32648 異夏佛塔苷 Isoschaftoside  52012-29-0 C26H28O14 564.492 10mg
32649 香草酸 Vanillic acid  121-34-6 C8H8O4 168.15 20mg
32650 香草醇 4-hydroxy-3-methoxybenzylalcohol(Vanillicalcohol) 498-00-0 C8H10O3 154.16 20mg
32651 香紫蘇醇 Sclareol 515-03-7  C20H36O2 308.5 20mg
32652 香紫蘇內(nèi)酯 Clareolide 564-20-5 C16H26O2 250.38 20mg
32653 香蜂草苷  Didymin 14259-47-3 C28H34O14 594.56 20mg
32654 異*內(nèi)酯 linderalactone 728-61-0 C15H16O3 244.29 20mg
32655 α-香附酮 α-Cyperone 473-08-5 C15H22O 218.33 20mg
32656 相思子堿 L-Abrine 21339-55-9 C12H14N2O2 218.25 20mg
32657 血竭素 Cochinchinenin  400603-95-4 C31H30O7 514.57 20mg
32658 血竭素高氯酸鹽 Dracohodin perochlorate 125536-25-6 C17H15ClO7 366.75 20mg
32659 香荊芥酚 5-Isopropyl-2-methylphenol 499-75-2 C10H14O 150.22 50mg
32660 纈草三酯 Valtrate 18296-44-1 C22H30O8 422.4688 20mg
32661 乙酰纈草三酯 Acevaltratum 20mg
32662 西*  Daphnoretin 2034-69-7  C19H12O6 336.29 20mg
32663 雪* Cedrol 77-53-2 C15H26O 222.37 20mg
32664 辛弗林（94-07-5） Synephrine 1994-7-5 C9H13NO2 167.21 20mg
32665 西紅花苷I CrocinⅠ 42553-65-1 C44H64O24 976.96 20mg
32666 西紅花苷II Crocin II 55750-84-0 C38H54O19 814.826 20mg
32667 藏紅花酸（UV98%） Potassium 7-Hydroxy-1-naphthalenesulfonate  30252-40-5 C10H7KO4S 262.32 20mg
32668 鷹嘴豆芽素A Biochanin A 491-80-5 C16H12O5 284.26 20mg
32669 亞麻木酚素 Secoisolariciresinol Diglucoside 148244-82-0 C32H46O16 542.57 20mg
32670 * Bengenin 477-90-7 C14H16O9 328.27 20mg
32671 鹽酸育亨賓 Yohimbine hydrochloride 65-19-0 C21H27ClN2O3 390.9 20mg
32672 野百合堿 Monocrotaline 315-22-0 C16H23NO6 325.36 20mg
32673 銀杏內(nèi)酯A Ginkgolide A 15291-75-5 C20H24O9 408.4 20mg
32674 銀杏內(nèi)酯B Ginkgolide B 15291-77-7 C20H24O10 424.4 20mg
32675 銀杏內(nèi)酯C Ginkgolide C 15291-76-6 C20H24O11 440.4 20mg
32676 銀杏內(nèi)酯J Ginkgolide J 107438-79-9 C20H24O10 424.4 20mg
32677 白果內(nèi)酯 Bilobalide 33570-04-6 C15H18O8 326.3 20mg
32678 白果新酸 Ginkgolic Acid (C13:0)  20261-38-5  C20H32O3  320.47 20mg
32679 銀杏酚酸 Ginkgolic acids 20mg
32680 * Folic acid 59-30-3 C19H19N7O6 441.4 20mg
32681 藥根堿 Jatrorrhizine 3621-38-3 C20H20NO4  338.38 20mg
32682 鹽酸藥根堿 Jatrorrhizine Hydrochloride 6681-15-8 C20H21ClNO4+ 374.842 20mg
32683 亞麻酸乙酯 Linolenic acid ethyl ester 1191-41-9 C20H34O2 306.48 20mg
32684 異嗪皮啶人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 Isofraxidin 486-21-5  C11H10O5 222.19 20mg
32685 原花青素（UV98%） Procyanidin 4852-22-6  C30H26O13 594.52 20mg
32686 原花青素B1（95%） Procyanidin B1 20315-25-7 C30H26O12 578.52 10mg
32687 原花青素B2 Procyanidin B2 29106-49-8 C30H26O12 578.52 10mg
32688 23-乙酰澤瀉醇B Alisol B 23-acetate 26575-95-1 C28H44O4  444.65 20mg
32689 羽扇豆醇 Lupeol 545-47-1 C30H50O 426.72 20mg

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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