人美洲商陸素(PWM)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人美洲商陸素(PWM)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

32680 * Folic acid 59-30-3 C19H19N7O6 441.4 20mg
32681 藥根堿 Jatrorrhizine 3621-38-3 C20H20NO4  338.38 20mg
32682 鹽酸藥根堿 Jatrorrhizine Hydrochloride 6681-15-8 C20H21ClNO4+ 374.842 20mg
32683 亞麻酸乙酯 Linolenic acid ethyl ester 1191-41-9 C20H34O2 306.48 20mg
32684 異嗪皮啶 Isofraxidin 486-21-5  C11H10O5 222.19 20mg
32685 原花青素（UV98%） Procyanidin 4852-22-6  C30H26O13 594.52 20mg
32686 原花青素B1（95%） Procyanidin B1 20315-25-7 C30H26O12 578.52 10mg
32687 原花青素B2 Procyanidin B2 29106-49-8 C30H26O12 578.52 10mg
32688 23-乙酰澤瀉醇B Alisol B 23-acetate 26575-95-1 C28H44O4  444.65 20mg
32689 羽扇豆醇 Lupeol 545-47-1 C30H50O 426.72 20mg
32690 異鼠李素 Isorhamnetin 480-19-3 C16H12O7 316.26 20mg
32691 鹽酸水蘇堿 Stachydrine hydrochloride  4136-37-2 C7H14ClNO2 179.64 20mg
32692 延齡草苷 Diosgenin glucoside 14144-06-0 C33H52O8 576.76 20mg
32693 原阿片堿 Protopine 130-86-9 C20H19NO5 353.37 20mg
32694 * Etoposide 33419-42-0 C29H32O13 588.56 20mg
32695 鹽酸益母草堿 Leonurine hydrochloride 24697-74-3 C14H22ClN3O5 347.79458 20mg
32696 乙酰紫堇靈 Acetylcorynoline 18797-80-3 C23H23NO6 20mg
32697 紫堇靈 (+)-corynoline 18797-79-0 C21H21NO5 367.399 20mg
32698 脫氫紫堇堿 Dehydrocorydaline C22H24NO4 366.44 20mg
32699 異鼠李素--3-O-β-D-葡萄糖苷 Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside 5041-82-7 C22H22O12 478.4 20mg
32700 鴨腳樹葉堿 2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester 4684-32-6 C20H22N2O3 338.405 20mg
32701 銀鍛苷 Tiliroside 20316-62-5 C30H26O13 594.52 20mg
32702 3－乙?；橄闼?nbsp; alpha-boswellic acid,3-acetyl 20mg
32703 3－乙?；?1－酮基乳香酸 beta-boswellic acid,3-acetyl,11-keto 20mg
32704 異甜菊醇  Isosteviol 27975-19-5 C20H30O3 318.45 10mg
32705 鹽酸吐根酚堿 Cephaeline hydrochloride 3738-70-3 C28H40Cl2N2O4 539.53 20mg
32706 一枝蒿甲素   Bullatine A 1354-84-3 C22H33NO2  20mg
32707 異虎耳草素  Isopimpinellin 482-27-9 10mg
32708 野漆樹苷 Rhoifolin 17306-46-6 C27H30O14 578.52 20mg
32709 女貞苷 ligustroflavone 260413-62-5 C33H40O18 724.67 20mg
32710 α-亞麻酸 Linolenic acid 463-40-1 C18H30O2 278.43 20mg
32711 洋艾素（95%） Absinthin C20H20O8 388.37 20mg
32712 異型南五味子丁素 Heteroclitin D 20mg
32713 油酸 cis-9-Octadecenoic acid 112-80-1 C18H34O2 282.46 20mg
32714 雅姆皂苷元  Yamogenin 512-06-1     10mg
32715  8-乙氧基滇烏堿（95%）  8-O-ethylyunaconitine     C35H51NO10    20mg
32716  硬飛燕草堿 Delsoline   509-18-2  C25H41NO7 467.599  20mg
32717 蕓苔素內(nèi)酯 Brassinolide 72962-43-7 C28H48O6 480.68 20mg
32718 一葉萩堿 Securinine  5610-40-2  C13H15NO2 217.26 20mg
32719 一枝蒿庚素 Bullatine G C22H31NO3  10mg
32720 茵芋堿 Chloroxylonine 83-95-4 C14H15NO4 261.27 20mg
32721 異鼠李素-3-O-半乳糖苷 Isorhamnetin-3-O-galactoside  6743-92-6 C22H22O12 478.41
10mg
32722 2-O-乙酰山椒子烯酮 2-O-Acetylzeylenone
C23H20O8
424.41
10mg
32723 野菊花內(nèi)酯 Yejunualactone C32H40O8
552.66
10mg
32724 愈創(chuàng)木酚 Guaiacol 1990-5-1 C7H8O2 124.14 20mg
32725 伊立替康 irinotecan C33H38N4O6 20mg
32726 * Irinotecan hydrochloride 100286-90-6 C33H39ClN4O6 623.14 20mg
32727 * BerbaMine dihydrochloride 6078-17-7 C37H42Cl2N2O5 665.65 20mg
32728 梓醇 Catalpol 2415-24-9 C15H22O10 362.33 20mg
32729 紫杉肽 paclitaxtide 20mg
32730 獐牙菜苷 Sweroside 14215-86-2 C16H22O9 358.34 20mg
32731 獐牙菜苦苷 Swertiamarine 17388-39-5 C16H22O10 374.34 20mg
32732 紫菀酮 Shionone 10376-48-4 C30H50O 426.72 20mg
32733 紫蘇葶 Perillartine 30950-27-7 C10H1565.23 20mg
32734 紫蘇醛 l-Perillaldehyde 18031-40-8 C10H14O 150.22 20mg
32735 棕櫚酸乙酯 Palmitic acid ethyl ester 628-97-7 C18H36O2 284.48 20mg
32736 樟腦 Camphor人美洲商陸素(PWM)ELISA試劑盒 76-22-2 C10H16O 152.23 20mg
32737 知母皂苷 BⅡ Timosaponin BII 136656-07-0 C45H76O19 921.076 20mg
32738 知母皂苷A-Ⅲ Timosaponin A-III 41059-79-4 C39H64O13 740.92 20mg
32739 知母皂苷元 Sarsasapogenin 82597-74-8 C27H44O3 416.64 20mg

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人美洲商陸素(PWM)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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