人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

32435 蒲公英甾醇 Taraxasterol 1059-14-9 C30H50O 426.72 20mg
32436 * Colchicine 64-86-8 C22H25NO6 399.44 20mg
32437 青藤堿 Sinomenine 115-53-7 C19H23NO4 329.39 20mg
32438 * Sinomenine hydrochloride  6080-33-7 G19H23 NO3HCl  365.85 20mg
32439 羥基*A Hydroxysafflor yellow A 146087-19-6 C27H32O16 612.53 20mg
32440 茄尼醇 Solanesol 13190-97-1 C45H74O 631.07 20mg
32441 秦皮甲素 Esculin 531-75-9 C15H16O9 340.28 20mg
32442 秦皮素 Fraxetin 574-84-5 C10H8O5 208.17 20mg
32443 秦皮乙素 Esculetin 305-01-1 C9H6O4 178.14 20mg
32444 秦皮苷 fraxin 524-30-1 C16H18O10 370.31 20mg
32445 千金子二萜醇 Lathyrol 34420-19-4 C20H30O4 334.45 20mg
32446 千金藤素 Cepharanthine 481-49-2 C37H38N2O6 606.71 20mg
32447 千金子甾醇（95%） Euphobiasteroid 28649-59-4 C32H40O8  552.67 20mg
32448 千層紙素A Oroxylin A 480-11-5 C16H12O5 284.26 20mg
32449 青陽參苷元  Qingyangshengenin  84745-94-8 C28H36O8 500.584 20mg
32450 10-羥基癸烯酸 10-Hydroxy-2-decenoic acid  14113-05-4 C10H18O3 186.25 20mg
32451 *醚內(nèi)酯 Linderane 13476-25-0 C15H16O4 260.29 20mg
32452 去甲異波爾定 Laurolitsine 5890-18-6 C18H19NO4 313.351 20mg
32453 奇壬醇 kirenol 52659-56-0 C20H34O4 338.48 20mg
32454 5-羥基* 5-Hydroxytryptophan 56-69-9 C11H12N2O3 220.22 20mg
32455 蘆丁 Rutin  153-18-4 C27H30O16 610.52 20mg
32456 * Troxerutin 7085-55-4 C22H34O3 346.5 20mg
32457 * Sodium Aescinate 20977-05-3 C55H85NaO24 1153.2 20mg
32458 七葉皂苷A Aescin IA  123748-68-5 C55H86O24 1131.26 10mg
32459  鹽酸去氫駱駝蓬堿 Harmine Hydrochloride 343-27-1 C13H13ClN2O 248.71  20mg
32460 去氫駱駝蓬堿 Harmine  442-51-3 C13H12N2O 212.25 20mg
32461 5-羥甲基糠醛 5-Hydroxymethylfurfural 67-47-0 C6H6O3 126.11 20mg
32462 芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 Apigenin 7-glucoside 578-74-5 C21H20O10 432.38 5mg
32463 芫花素 Genkwanin 437-64-9 C16H12O5 284.26 20mg
32464 羥基芫花素 Hydroxygenkwanin 20243-59-8 C16H12O6  300 10mg
32465 喬松素 Ponocembrin 480-39-7  C15H12O4  256.25 20mg
32466 榿木酮 Alnusone 33457-62-4 C19H18O  262.35 20mg
32467  13-去羥基印烏堿  13-Dehydroxyindaconintine   C34H47NO9 613.74 20mg
32468 去氫荷包牡丹堿 Dehydrodicentrine C20H19NO4
337.38
10mg
32469 5-羥基-7,8-二甲氧基黃酮 5-hydroxy-7,8-dimethoxyflavone 3570-62-5 C17H14O5 298.30
10mg
32470 5-羥基-6,7-二甲氧基黃酮 5-Hydroxy-6,7-dimethoxylflavone
740-33-0
C17H14O5 298.30
10mg
32471 芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷 Apigenin-7-O-glucuronide  29741-09-1
C21H18O11 446.37
10mg
32472 芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷 Apigenin-7-O-β-D-glucoside
578-74-5
C21H20O10
 432.38
10mg
32473 芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷-6'-乙酯 Apigenin-7-O-glucuronide-6'-ethyl ester
C23H22O11
474.42
10mg
32474 1-羥基-2,3,4,7-四甲氧基山山酮 1-Hydroxy-2,3,4,7-tetramethoxyxanthone 14103-09-4 C17H16O7 332.31 10mg
32475 芹菜苷 Apiin 26544-34-3 C26H28O14 564.49 20mg
32476 去甲*堿 Higenamine  5843-65-2 C16H17NO3 271.314 20mg
32477 鹽酸去甲*堿 Higenamine hydrochloride
11041-94-4 
20mg
32478 羥基酪醇 3,4-Dihydroxyphenylethanol 10597-60-1 C8H10O3 154.16 20mg
32479 3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黃酮 5,6,7,8,3,4-heptemthoxyflavone C22H24O9 432 10mg
32480 漆黃素 Fisetin 528-48-3 C15H10O6 286.24 20mg
32481 芹菜素 Apigenin 520-36-5 C15H10O5 270.24 20mg
32482 肉桂醛 Cinnamaldehyde 104-55-2 C9H8O 132.16 20mg
32483 肉桂醇 Cinnamyl alcohol 104-54-1 C9H10O 134.18 20mg
32484 肉桂酸 Cinnamic acid  621-82-9 C9H8O2 148.16 20mg
32485 擬人參皂苷F11 Pseudoginsenoside F11
69884-00-0 C42H72O14 801.01 20mg
32486 擬人參皂苷RT5 Pseudoginsenoside RT5 98474-78-3 C36H62O10 654.876 20mg
32487 人參皂苷RC Ginsenoside Rc 11021-14-0 C53H90O22 1079.27 20mg
32488 人參皂苷RD Ginsenoside Rd 52705-93-8 C48H82O19 963.15 20mg
32489 人參皂苷Rb1 Ginsenoside Rb1  41753-43-9 C54H92O23 1109.29 20mg
32490 人參皂苷Rb2 Ginsenoside Rb2 11021-13-9 C53H90O22 1079.27 20mg
32491 人參皂苷Rb3人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒 Ginsenoside Rb3 68406-26-8 20mg
32492 人參皂苷Rg1 Ginsenoside Rg1  22427-39-0 C42H72O14 801.01 20mg
32493 (S型)人參皂苷Rg2 Ginsenoside Rg2 52286-74-5 C42H72O13  785.01 20mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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