人糖銨聚糖(GAG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人糖銨聚糖(GAG)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

32246 黃腐酚  Xanthohumo 6754-58-1  C21H22O5  354.4 20mg
32247 胡椒堿 Piperine 94-62-2 C17H19NO3 285.34 20mg
32248 絞股藍(lán)皂苷 Gynostemma Pentaphyllum P.E. Gypenoside 11028-00-5  C41H68O13 768.975 20mg
32249 絞股藍(lán)皂苷XLIX Gypenoside XLIX C52H86O21 1047.2266 10mg
32250 菊苣酸 Cichoric acid 70831-56-0 C22H18O12 474.37 20mg
32251 N-甲基野靛堿 Caulophylline 486-86-2 C12H16N2O 204.27 20mg
32252 金雀花堿 Cytisine 485-35-8 C11H14N2O 190.24 20mg
32253 積雪草酸 Asiatic acid 464-92-6 C30H48O5 488.7 20mg
32254 積雪草苷 Asiaticoside 16830-15-2 C48H78O19 959.12 20mg
32255 羥基積雪草酸 Madecassic acid 18449-41-7 C30H48O6 504.7 20mg
32256 羥基積雪草苷 Madecassic acid 18449-41-7 C30H48O6 504.7 20mg
32257 雞II型膠原蛋白 10mg
32258 金絲桃苷 Hyperoside  482-36-0 C21H20O12 464.38 20mg
32259 2"-O-沒食子酰基金絲桃苷 2"-O-Galloylhyperin 53209-27-1 C28H24O16 616.48 20mg
32260 金絲桃素 Hypericin 548-04-9 C30H16O8 504.44 10mg
32261 桔梗皂苷D Platycodin D 58479-68-8 C57H92O28 1225.33 20mg
32262 去芹菜糖桔梗皂苷D Deapio-platycodin D 78763-58-3 C52H84O24 1092.32 10mg
32263 桔梗皂苷元 platycodigenin 22327-82-8  C21H13NO3     20mg
32264 梔子苷 Geniposide 24512-63-8 C17H24O10 388.37 20mg
32265 京尼平苷酸 Geniposidic acid 27741-01-1 C16H22O10 374.34 20mg
32266 京尼平 Genipin 6902-77-8 C11H14O5 226.23 20mg
32267 6-姜酚 6-Gingerol 23513-14-6  C17H26O4 294.39 20mg
32268 8-姜酚 8-Gingerol 30462-35-2  C43H32O20 868.7 20mg
32269 10-姜酚 10-Gingerol 23513-15-7 C21H34O4 350.49 20mg
32270 6-姜烯酚 6-Shogaol 555-66-8 C17H24O3 276.37 20mg
32271 姜酮 Zingerone 122-48-5 C11H14O3 194.23 20mg
32272 劍麻皂苷元 Tigogenin 77-60-1 C27H44O3 416.64 20mg
32273 吉馬酮 Germacrone 6902-91-6 C15H22O 218.33458 20mg
32274 * Galantamine Hydrobromide
1953-4-4 C17H21NO3·HBr 368.27 20mg
32275 加蘭他敏 Galanthamine 357-70-0 C17H21NO3 287.35 20mg
32276 肌醇  Inositol  87-89-8 C6H12O6 180.16 20mg
32277 蓮心堿 Liensinine 2586-96-1 C37H42N2O6 610.74 20mg
32278 蓮心堿高氯酸鹽 Liensinine perchlorate 5088-90-4 C37H42N2O6.2(HClO4) 811.67 20mg
32279 甲基蓮心堿 Neferine 2292-16-2 C38H44N2O6 624.77 20mg
32280 異蓮心堿 Isoliensinine 6817-41-0 C37H42N2O6 610.747 20mg
32281 4-甲氧基水楊醛 2-Hydroxy-4-methoxybenzaldehyde 673-22-3 C8H8O3 152.15 20mg
32282 5-甲基-7-甲氧基異黃酮 5-Methyl-7-methoxyisoflavone 82517-12-2 C17H14O3 266.29 20mg
32283 巨大戟醇  Ingenol 30220-46-3  C20H28O5  348.43 20mg
32284 3'-甲氧基-5'-羥基異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷  3’-methoxy-5’-hydroxyisoflavone-7-O-β-D-glucoside C22H20O10
446.41
10mg
32285 雞豆黃素A 5,7-Dihydrox -4'-methoxyisoflavone 491-80-5 C16H12O5 284.26 20mg
32286 當(dāng)藥寧 Swertianin 20882-75-1 C14H10O6 274.23
10mg
32287 甲基當(dāng)藥寧 Methylswertianin 22172-17-4
C15H12O6  288.25
10mg
32288 訶子鞣質(zhì) （97%） Chebulagic acid
23094-71-5
C41H30O27
954.66
10mg
32289 焦袂康酸 3-hydroxy-4H-pyran-4-one  496-63-9  C5H4O3  112.08346 20mg
32290 5-O-甲基維斯阿米醇苷 5-O-Methylvisammioside 84272-85-5 C22H28O10 452.453 20mg
32291 4-甲氧基水楊酸 4-Methoxysalicylic acid 2237-36-7 C8H8O4 168.15 20mg
32292 * Caffeic acid 331-39-5 C9H8O4 180.16 20mg
32293 柯里拉京 Corilagin 23094-69-1 C27H22O18 634.45 20mg
32294 熊果酸 Ursolic acid 77-52-1  C30H48O3 456.7 20mg
32295 * Oleanic acid 508-02-1 C30H48O3 456.71 20mg
32296 科羅索酸 Corosolic acid 4547-24-4 C30H48O4 472.7 20mg
32297 山楂酸 Maslinic acid 4373-41-5 C30H48O4 472.7 20mg
32298 款冬酮 Tussilagone 110042-38-1 C21H30O3 330.47 20mg
32299 杠柳毒苷 Periplocin 13137-64-9 C36H56O13 696.825 20mg
32300 * Theobromine 83-67-0 C7H8N4O2 180.16 20mg
32301 苦蒿素 Blinin 125675-09-4 C22H32O6 392.48588 20mg
32302  奎寧 Quinine 130-95-0 C20H24N2O2 324.42 20mg
32303  D-(-)-奎寧酸 Quinic acid 77-95-2 C7H12O6 192.17 20mg
32304 苦玄參苷IA Picfeltarraenin ⅠA 97230-47-2  C41H62O13 C41H62O13 20mg
32305 苦馬豆素 人糖銨聚糖(GAG)ELISA試劑盒Swainsonine 72741-87-8 C8H15NO3 173.21 1mg
32306 * Matrine 519-02-8 C15H24N2O 248.36 20mg
32307 氧化* Ammothamnine 16837-52-8 C15H24N2O2 264.36 20mg
32308 柯諾辛 Corynoxine 76-66-4 C22H28N2O4 384.46 20mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人糖銨聚糖(GAG)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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