人3-硝基*(3-NT)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人3-硝基*(3-NT)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

32184 甘松新酮 Nardosinone 23720-80-1 23720-80-1 250.3 20mg
32185 告達(dá)庭 Caudatin 38395-02-7 C28H42O7 490.633 20mg
32186 橄欖苦苷 Oleuropein 32619-42-4 C25H32O13 540.51 20mg
32187 厚樸酚 Magnolol  528-43-8 C18H18O2 266.33 20mg
32188 和厚樸酚 Honokiol  35354-74-6 C18H18O2 266.33 20mg
32189 黃杞苷 Engeletin 572-31-6 C21H22O10 434.39 20mg
32190 胡黃連苷Ⅰ PicrosideⅠ 27409-30-9 C24H28O11 492.47 20mg
32191 胡黃連苷Ⅱ Picroside Ⅱ 39012-20-9 C23H28O13 512.46 20mg
32192 胡黃連苷 III 64461-95-6 C25H30O13 538.499 10mg
32193 * Artemether 71963-77-4 C16H26O5 298.37 20mg
32194 青*  Artesunate 88495-63-0 C19H28O8 384.42 20mg
32195 青蒿酸 Artemisinic acid  80286-58-4 C15H22O2 234.33 20mg
32196 毛蕊異黃酮苷 Calycosin-7-O-beta-D-glucoside 20633-67-4 C22H22O10 446.4 20mg
32197 毛蕊異黃酮 Calycosin 20575-57-9 C16H12O5 284.26 20mg
32198 黃芪甲苷 Astragaloside IV 84687-43-4 C41H68O14 784.97 20mg
32199 環(huán)黃芪醇 Cycloastragenol 84605-18-5 C30H50O5  490.71 20mg
32200 黃芪皂苷III Astragaloside Ⅲ 84687-42-3 C41H68O14 784.974 10mg
32201 黃芪皂苷II AstragalosideⅡ 84676-89-1 C41H66O15 798.95 10mg
32202 黃芪皂苷I AstragalosideⅠ 84680-75-1 C43H68O16 840.99 10mg
32203 乙酰黃芪皂苷I Acetytastragaloside       10mg
32204 紫云英苷 Astragalin 480-10-4 C21H20O11 448.38 20mg
32205 灰氈毛忍冬皂苷乙 Macranthoidin B 136849-88-2 C65H106032 1399.53 20mg
32206 * Palmatine 3486-67-7 C21H22NO4+ 352.4 20mg
32207 * Baicalin  21967-41-9 C21H18O11 446.36 20mg
32208 黃芩素 Baicalein 491-67-8 C15H10O5 270.24 20mg
32209 漢* Wogonoside  51059-44-0 C6H10O7 194.1394 20mg
32210 漢黃芩素 Wogonin  632-85-9  C16H12O5 284.26 20mg
32211 哈巴俄苷 Harpagoside 19210-12-9 C24H30O11 494.49 20mg
32212 哈巴苷 Harpagide 6926-8-5 C15H24O10 364.35 20mg
32213 乙酰哈巴苷 8-O-Acetylharpagide 6926-14-3 C17H26O11  406.38 20mg
32214 黃柏堿 Phellodendrine 6873-13-8 C20H24NO4   342.413 20mg
32215 鹽酸黃柏堿 Phellodendrine chloride 104112-82-5 C20H24NO4.Cl 377.866 20mg
32216 黃柏酮 Obacunone 751-03-1 C26H30O7 454.516 20mg
32217 黃楊堿 Cyclovirobuxine 860-79-7 C26H46N2O  402.66 20mg
32218 亥茅酚苷 Sec-O-Glucosylhamaudol 80681-44-3 C21H26O10 438.426 20mg
32219 * Allomatrine 641-39-4 C15H24N2O 248.36 20mg
32220 槐果堿 Sophocarpine 145572-44-7 C15H22N2O 246.35 20mg
32221 氧化槐果堿  Oxysophocarpine 26904-64-3 C15H22N2O2 262.351 20mg
32222 槐角苷 Sophoricoside 152-95-4 C21H20O10 432.38 20mg
32223 ?？略碥赵?5%） Hecogenin 467-55-0 C27H42O4 430.62 20mg
32224 環(huán)氧澤瀉烯 Alismoxide 87701-68-6 C15H26O2 238.37 20mg
32225 絡(luò)塞琳 Rosarin 84954-93-8 C20H28O10 428.43 10mg
32226 絡(luò)緦 Rosin 85026-55-7 C15H20O6 296.32 10mg
32227 絡(luò)塞定 Rosiridin 100462-37-1 C16H28O7 332.39 10mg
32228 絡(luò)塞維 Rosavin 84954-92-7 C20H28O10 428.43 20mg
32229  酪醇 4-Hydroxyphenethyl alcohol  501-94-0 C8H10O2 138.16 20mg
32230 紅景天苷 Salidroside 10338-51-9 C14H20O7 300.3 20mg
32231 荷葉堿 Nuciferine 475-83-2 C19H21NO2 295.38 20mg
32232 葒草苷 Orientin 28608-75-5 C21H20O11 448.38 20mg
32233 異葒草素 Homoorientin 4261-42-1  C21H20O11  448.38 20mg
32234 *B cucurbitacin B 6199-67-3 C32H46O8 558.7 20mg
32235 * E  cucurbitacin E 18444-66-1 C32H44O8 556.69 10mg
32236 * D Cucurbitacin D 3877-86-9 C30H44O7 516.67 10mg
32237 雪膽乙素  Dihydrocucurbitacin F   C30H48O7 20mg
32238 *甲 Curcurbitacin IIa 58546-34-2 C32H50O8 562.73 20mg
32239 黃獨(dú)素B Diosbulbin B 20086-06-0 C19H20O6  20mg
32240 黑芥子苷人3-硝基*(3-NT)ELISA試劑盒 Sinigrin  3952-98-5 C10H16KNO9S2 397.49 20mg
32241 湖貝堿甲  Hupehenine 98243-57-3 C27H45NO2 415.65 20mg
32242 葫蘆巴堿 Trigonelline  535-83-1 C7H7NO2 137.14 20mg
32243 鹽酸葫蘆巴堿 Trigonelline Hydrochloride 6138-41-6 C7H8ClNO2 173.6  20mg
32244 琥珀酸 Butane diacid 110-15-6 C4H6O4 118.09 200mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人3-硝基*(3-NT)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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