人*(CH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人*(CH)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

32061 丁烯基苯酞 n-Butylidenephthalide 551-08-6 C12H12O2 188.22 20mg
32062 洋川芎內(nèi)酯A Senkyunolide A 62006-39-7 C12H16O2 192.25 20mg
32063 藁本內(nèi)酯 Ligustilide 4431-01-0 C12H14O2 190.24 20mg
32064 *（UV98%) Allicin 539-86-6 C6H10OS2 162.27 20mg
32065 蒜氨酸 (S)-3-(Allylsulphinyl)-L-alanine 556-27-4 C6H11NO3S 177.22 20mg
32066 大戟二烯醇 Euphol 514-47-6 C30H50O 426.724 20mg
32067 燈盞花甲素  apigenin-7-O-glucronide       5mg
32068 野* Scularin 27740-01-8 C21H18O12 462.36 20mg
32069 高黃芩素 Sculartln 529-53-3 C15H10O6 286.24 20mg
32070  德爾塔林 Deltaline 6836-11-9  C27H41NO8 421.57 20mg
32071 麥冬皂苷A Ophiopogonin A  11054-24-3 C41H64O13  764.944 10mg
32072 麥冬皂苷B Ophiopogonin B  38971-41-4  C39H62O12 722.907 20mg
32073 麥冬皂苷C Ophiopogonin C  911819-08-4  C46H72O17  897.058 10mg
32074 麥冬皂苷D Ophiopogonin D 945619-74-9 C44H70O16 855.02 10mg
32075 短葶山麥冬皂苷C Liriope muscari baily saponins C 87480-46-4  C44H70O17 871 20mg
32076 山麥冬皂苷B Liriopesides B 20mg
32077 魯斯可皂苷元 Ruscogenin 472-11-7 C27H42O4 430.62 20mg
32078 多舌飛蓬苷 6’-O-Caffeoylerigeroside C20H20O11  10mg
32079 莪術(shù)醇 Curcumol 4871-97-0 C15H24O2 236.35 20mg
32080 莪術(shù)烯 Curzerene   C15H20O
2  216.3187 20mg
32081 莪術(shù)二酮 Germacr-1(10)-ene-5,8-dione 13657-68-6 C15H24O2 236.35 20mg
32082 1，8-二羥基蒽醌 1,8-Dihydroxyanthraquinone 117-10-2 C14H8O4 240.21 20mg
32083 3-O-咖啡酰奎寧酸（97%） 3-O-caffeoylquinic acid  327-97-9   C16H18O9
  354.09 10mg
32084 1,5-O-二咖啡?？鼘幩?Cynarin 30964-13-7  C25H24O12 516.45 20mg
32085 1,3-O-二咖啡?？鼘幩?Cynarin 1182-34-9 C25H24O12 516.45 20mg
32086 綠原酸 Chlorogenic acid 327-97-9 C16H18O9 354.31 20mg
32087 新綠原酸 Neochlorogenic acid 906-33-2 C16H18O9 354.30872 20mg
32088 隱綠原酸 Cryptochlorogenic acid 905-99-7 C16H18O9 354.309 20mg
32089 異綠原酸A Isochlorogenic acid A 2450-53-5 C25H24O12 516.453 20mg
32090 異綠原酸B Isochlorogenic acid B 14534-61-3 C25H24O12 516.45 20mg
32091 異綠原酸C Isochlorogenic acid C 32451-88-0 C25H24O12 516.453 20mg
32092 冬綠苷 Gaultherin 490-67-5 C19H26O12  446.4 20mg
32093 甜葉懸鉤子苷 Rubusoside 64849-39-4  C32H50O13 642.73 10mg
32094 乙氧基白屈菜紅堿 Ethoxychelerythrine 152743-19-6 C23H23NO5 393.43 10mg
32095 紫萁酮 Osmundacetone C10H10O3
178 20mg
32096 二氫姜黃素 Dihydrocurcumin 20mg
32097 姜黃素 Curcumin  458-37-7 C21H20O6 368.38 20mg
32098 去甲氧基姜黃素 Demethoxycurcumin 22608-11-3 C20H18O5 338.35 20mg
32099 雙去氧基姜黃素 Bisdemethoxycurcumin 24939-16-0 C19H16O4 308.33 20mg
32100 二苯乙烯苷 2,3,5,4-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside 82373-94-2 C20H22O9 406.39 20mg
32101 3,29-二苯甲?；闃侨嗜?3,29-Dibenzoyl rarounitriol 873001-54-8 C44H58O5 666.937 20mg
32102 β，β’-二甲基丙烯酰阿卡寧 β, β-dimethyl-acry-lalkannin 34539-65-6 C21H22O6 370.4 20mg
32103 紫草素 Shikonin 517-89-5 C16H16O5 288.3 20mg
32104 紫草氰苷 Lithosprmoside 63492-69-3 C14H19NO8 329.11 20mg
32105 二氫辣椒素 Dihydrocapsaicin 19408-84-5 C18H29NO3 307.43 20mg
32106 辣椒素 Capsaicin  2444-46-4 C17H27NO3 293.4 20mg
32107 天然辣椒素 Capsaicinoids 404-86-4 20mg
32108 槲皮素 Quercetin  117-39-5 C15H14O9 338.27 20mg
32109 二氫槲皮素 Taxifolin 480-18-2 C15H12O7 304.25 20mg
32110 槲皮苷 Quercitrin 522-12-3 C21H20O11 448.38 20mg
32111 異槲皮苷 Isoquercitrin 482-35-9
C21H20O12 464.38 20mg
32112 槲皮素-7-O-葡萄糖苷 Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside 491-50-9 C21H20O12 464.38 10mg
32113 槲皮素-3-O-β-D-葡糖糖-7-O-β-D-龍膽雙糖苷 Quercetin-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-β-D-gentiobiosid 20mg
32114 楊梅素 Myricetin 529-44-2 C15H10O8 318.24 20mg
32115 二氫楊梅素 Dihydromyricetin 27200-12-0 C15H12O8 320.25 20mg
32116 楊梅苷 Myricitrin 17912-87-7 C21H20O12 464.38 20mg
32117 1,7-二羥基-3,4-二甲氧基山酮-7-O-葡萄糖苷 1,7-Dihydroxy-3,4-dimethoxylxanthone-7-O-glucoside C21H22O11 450.4 10mg
32118 3,3'-O-二甲基鞣花酸 3,3’-Di-O-methylellagic acid  2239-88-5
C16H10O8
330.25 人*(CH)ELISA試劑盒10mg
32119 鞣花酸 Ellagic acid 476-66-4 C14H6O8 302.19 20mg
32120 ５,７-二羥基色原酮 5,7-dihydroxychromone 31721-94-5 C9H6O4
178.15
10mg
32121 石蒜堿 Lycorine  476-28-8 C16H17NO4 287.31 20mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人*(CH)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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