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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-13 21:05:53瀏覽次數(shù):258次
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人載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
32000 丹參酮IIA Tanshinone IIA 568-72-9 C19H18O3 294.34 20mg
32001 丹參素鈉 Sodium danshensu 67920-52-9 C9H9O5.Na 220.155 20mg
32002 丹參素 Danshensu 76822-21-4 C9H10O5 198.17 20mg
32003 二氫丹參酮Ⅰ Dihydrotanshinone I 87205-99-0 C18H14O3 278.3 20mg
32004 隱丹參酮 Cryptotanshinone 35825-57-1 C19H20O3 296.36 20mg
32005 丹參新酮 Miltirone 27210-57-7 C19H22O2 282.39 10mg
32006 丹酚酸A Salvianolic acid A 96574-01-5 C26H22O10 494.45 20mg
32007 丹酚酸B Salvianolic acid B 115939-25-8 C36H30O16 718.617 20mg
32008 丹酚酸C Salvianolicacid C 115841-09-3 C26H20O10 492 20mg
32009 丹酚酸D Salvianolicacid D 142998-47-8 C20H18O10 418.35 10mg
32010 紫草酸 Lithospermic acid 28831-65-4 C27H22O12 538.459 20mg
32011 地膚子皂苷Ic Momordin Ic 96990-18-0 C41H64O13 764.944 20mg
32012 大豆苷 Daidzin 552-66-9 C21H20O9 416.38 20mg
32013 大豆苷元 Daidzein 486-66-8 C15H10O4 254.24 20mg
32014 黃豆黃苷 Glycitin 40246-10-4 C22H22O10 446.4 20mg
32015 黃豆黃素 Glycitein 40957-83-3 C16H12O5 284.26 20mg
32016 對甲氧基肉桂酸乙酯 ethylp-methoxycinnamate 24393-56-4 C12H14O3 206.24 20mg
32017 去氫二異* Dehydrodiisoeugenol 2680-81-1 C20H22O4 326.39 20mg
32018 異* Isoeugenol 97-54-1 C10H12O2 164.2 20mg
32019 丁香油(UV98%) Clove oil 8000-34-8 20mg
32020 丁香酸 Syringic acid 530-57-4 C9H10O5 198.17 20mg
32021 丁香醛 3,5-Dimethoxy-4-hydroxybenzaldehyde 134-96-3 C9H10O4 182.17 20mg
32022 * Eugenol 97-53-0 C10H12O2 164.2 20mg
32023 原百部堿 protostemonine 27495-40-5 C23H31NO6 417.4953 10mg
32024 原百部次堿 Protostemotinine 169534-85-4 C23H29NO6 415.4795 5mg
32025 對葉百部堿 Tuberostemonine 6879-1-2 C22H33NO4 375.506 20mg
32026 地榆皂苷Ⅰ Ziyuglycoside I 35286-58-9 C41H66O13 766.95 20mg
32027 地榆皂苷Ⅱ Ziyuglycoside II 35286-59-0 C35H56O8 604.8 20mg
32028 大茴香醛 Anisic aldehyde 123-11-5 C8H8O2 136.15 20mg
32029 黨參炔苷 Lobetyolin 136085-37-5 C20H28O8 396.433 10mg
32030 * Anethole trithione 532-11-6 C10H8OS3 240.36 20mg
32031 甲基異茜草素-1-甲醚 Rubiadin-1-methyl ether 7460-43-7 C16H12O4 268.267 5mg
32032 甲基異茜草素 Rubiadin、
1,3-Dihydroxy-2-methylanthraquinone
117-02-2 C15H10O4 254.24 20mg
32033 羥基茜草素(95%) Purpurin 81-54-9 C14H8O5 256.21 20mg
32034 大葉茜草素 Mollugin
55481-88-4 C17H16O4 284.31 20mg
32035 冬凌草甲素 Oridonin 28957-04-2 C20H28O6 364.43 20mg
32036 冬凌草乙素 Ponicidin 52617-37-5 C20H26O6 362.419 10mg
32037 對香豆酸 4-Hydroxycinnamic acid 501-98-4 C9H8O3 164.16 20mg
32038 大麥芽堿 Hordenine 539-15-1 C10H1565.23 20mg
32039 α-倒捻子素 α-mangostin 6147-11-1 C24H26O6 410.46 20mg
32040 γ-倒捻子素 γ- Mangostin 31271-07-5 C23H24O6 396.43 20mg
32041 對傘花烴 4-Isopropyltoluene 99-87-6 C10H14 134.22 20mg
32042 單寧酸(UV98%) Glycerite 1401-55-4 C76H52O46 1701.2 20mg
32043 * Cholesterol 57-88-5 C27H46O 386.65 20mg
32044 豆甾醇(95%) Stigmasterol 83-48-7 C29H48O 412.69 20mg
32045 β-谷甾醇 β-Sitosterol 83-46-5 C29H50O 414.71 20mg
32046 * Bilirubin 635-65-4 C33H36N4O6 584.66 20mg
32047 去氧膽酸 Deoxycholic acid 83-44-3 C24H40O4 392.57 20mg
32048 膽酸 Cholic acid 81-25-4 C24H40O5 408.57 20mg
32049 丁溴酸東莨菪堿 Scopolamine butylbromide 149-64-4 C21H30BrNO4 440.37 20mg
32050 東莨菪堿 Scopolamine 51-34-3 C17H21NO4 303.35 20mg
32051 * Scopolamine hydrobromide 114-49-8 C17H22BrNO4 384.26 20mg
32052 東莨菪苷 Scopolin 531-44-2 C16H18O9 354.309 10mg
32053 大薊苷 Pectolinarin 28978-02-1 C29H34O15 622.57 20mg
32054 柳穿魚黃素 Pectolinarigenin 520-12-7 C17H14O6 314.28946 20mg
32055 豆腐果苷人載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA試劑盒 Helicid 80154-34-3 C13H16O7 284.26 20mg
32056 (-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷 (-)-Syringaresnol-4-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside 136997-64-3 C33H44O17 712.69 10mg
32057 丁香樹脂醇雙葡萄糖苷 Syringaresinol-di-O-glucoside 10mg
32058 *皂苷A Clinodiside A 916347-31-4 C48H78O19 959.125 10mg
32059 杜鵑素 Farrerol 24211-30-1 C17H16O5 300.31 20mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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