人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質量。

31877 表小檗堿 Epiberberine 6873-9-2 C20H18NO4 336.36 20mg
31878 二氫小檗堿 Canadine 522-97-4  C28H58O 410.76 20mg
31879 四氫小檗堿 Tetrahydroberberine 522-97-4 C20H21NO4 339.39 20mg
31880 黃連堿 Coptisine 3486-66-6 C19H14NO4 320.32 20mg
31881 鹽酸黃連堿 Coptisine chloride 6020-18-4 C19H14ClNO4 355.77 20mg
31882 甲基黃連堿 Worenine chloride C20H16ClNO4 838.64 20mg
31883 α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷 α-spinasteryl-3-O-β-D-glucoside       5mg
31884 扁塑藤素 Pristimerin 1258-84-0 C30H40O4 464.642 20mg
31885 * Paclitaxel 33069-62-4 C47H51NO14 853.91 20mg
31886 三尖杉寧堿 Cephalomannine 71610-00-9 C45H53NO14 831.9 20mg
31887 10－脫乙?；涂ǘII 10-Deacetylbaccatin III 32981-86-5 C29H36O10 544.59 20mg
31888 多烯* Docetaxel 114977-28-5 C43H53NO14 807.88 20mg
31889 7-表* 7-Epitaxol 105454-04-4 C47H51NO14 853.913 20mg
31890 7-表-10-去乙?；?（95%） Deacetyltaxol；10-Deacetyltaxol 78432-77-6 C45H49NO13 811.87 20mg
31891 D(+)-半乳糖 D-Galactose 59-23-4 C6H12O6 180.16 20mg
31892 * D(+)-Glucose 50-99-7 C6H12O6 180.16 100mg
31893 棉籽糖 D(+)-Raffinose pentahydrate 17629-30-0  C18H42O21 594.51 20mg
31894 3,6’-二芥子?；崽牵?0%） 3,′6-d isinapoyl sucrose C36H46O17 754 
20mg
31895 蔗糖 Sucrose 57-50-1 C12H22O11 342.3 100mg
31896 耐斯糖 Nystose  13133-07-8 C24H42O21 666.58 20mg
31897 苦杏仁苷 Amygdalin 29883-15-6 C20H27 457.43 20mg
31898 扁桃酸 Mandelic acid 611-71-2 C8H8O3 152.15 20mg
31899 長春新堿 Vincristine 57-22-7 C46H56N4O10 824.96 20mg
31900 長春花堿 Vinblastine 865-21-4 C46H58N4O9 810.97 20mg
31901 長春質堿 Catharanthine 2468-21-5 C21H24N2O2 336.43 20mg
31902 文多靈 Vindoline 2182-14-1 C25H32N2O6 456.53 20mg
31903 長春瑞濱 VINORELBINE 71486-22-1 C45H54N4O8
778.94 20mg
31904 長春胺 Vincamine 1617-90-9
C21H26N2O3
354.44 20mg
31905 * Vinpocetine 42971-09-5 C22H26N2O2 350.46 20mg
31906 川續(xù)斷皂苷乙 Dipsacoside B 33289-85-9 C53H86O22 1075.24 20mg
31907 川續(xù)斷皂苷Ⅵ Akebia saponin D 39524-08-8 C47H76O18  929.099 20mg
31908 * Hesperidin 520-26-3 C28H34O15 610.56 20mg
31909 橙皮素 Hesperetin
520-33-2 C16H14O6 302.28 20mg
31910 橘皮素 Tangeretin 481-53-8 C20H20O7 372.37 20mg
31911 甲基*（95%） Methyl hesperidin 11013-97-1 C29H36O15 624.59 20mg
31912 新*二氫查爾酮 Neosperidin dihydrochalcone  20702-77-6 C28H36O15 612.58 20mg
31913 新* Neohesperidin 13241-33-3 C28H34O15 610.56 20mg
31914 異鼠李素-3-O-新* Isorhamnetin-3-O-nehesperidine 55033-90-4 C28H32O16  20mg
31915 香蒲新苷 Typhaneoside 104472-68-6 C34H42O20 770.686 20mg
31916 橙黃決明素 Aurantio-obtusin 67979-25-3 C17H14O7 330.291 20mg
31917 刺五加苷E Eleutheroside E 39432-56-9 C34H46O18 742.72 20mg
31918 刺五加苷B Eleutheroside B  118-34-3 C17H24O9 372.37 20mg
31919 胡蘿卜苷 Eleutheroside A 474-58-8 C35H60O6 576.85 20mg
31920 β-胡蘿卜素 β-Carotene 7235-40-7 C40H56 536.87 20mg
31921 葉黃素（90%） Xanthophyll 127-40-2 C40H56O2 568.87 20mg
31922 *內(nèi)酯 Andrographolide 5508-58-7 C20H30O5 350.45 20mg
31923 *新苷  neoandrographolide 27215-14-1 C26H40O8 480.591 20mg
31924 脫水*內(nèi)酯（99%） Dehydroandrographolide 134418-28-3 C20H28O5 348.43 20mg
31925 * Kalii Dehydrographolidi Succinas C28H35KO10 570.68 20mg
31926 淫羊藿苷 Icariin 489-32-7 C33H40O15 676.66 20mg
31927 朝藿定C Epmedin C 110642-44-9 C39H50O19 822.8 20mg
31928 朝藿定B Epmedin B 110623-73-9 C38H48O19 808.78 20mg
31929 朝藿定A Epimedin A 110623-72-8 C39H50O19 822.8 20mg
31930 朝藿定A1 Epimedin A1 140147-77-9 C39H50O20 838.804 10mg
31931 寶藿苷Ⅰ Baohuoside I 113558-15-9 C27H30O10  514.52 20mg
31932 淫羊藿次苷I（95%） Icarisid I  人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒C27H30O11  530.52 20mg
31933 脫水淫羊藿素 Anhydroicaritin  38226-86-7 C21H20O6  368.38 20mg
31934 淫羊藿素 Oxypeucedanin 737-52-0 C16H14O5 286.28 20mg
31935 川陳皮素 Naringin 10236-47-2 C27H32O14 580.53 20mg
31936 去甲基川陳皮素 Demethylnobiletin 2174-59-6 C20H20O8  388.37 10mg

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質控、室間質評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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