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*（LH）ELISA試劑盒

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*(LH)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

*(LH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在*(LH)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

31650 臍靜脈平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31651 臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31652 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31653 冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31654 腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31655 食管上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31656 食管平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31657 腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31658 腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31659 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31660 小腸平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31661 結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31662 直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31663 小腸粘膜上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31664 結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31665 直腸粘膜上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31666 肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31667 肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31668 肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31669 肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31670 肝星形細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31671 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31672 胃粘膜上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31673 腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31674 腎近曲管狀上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31675 腎皮層上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31676 腎上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31677 輸尿管上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31678 腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31679 腎系膜細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31680 膀胱上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31681 膀胱平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31682 腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31683 腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31684 腎成纖維細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31685 膀胱成纖維細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31686 尿道上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31687 胎盤羊膜細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31688 胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31689 胎盤絨毛膜細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31690 子宮平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31691 子宮成纖維細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31692 卵巢上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31693 卵巢成纖維細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31694 卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31695 子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31696 淋巴內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31697 淋巴成纖維細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31698 淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31699 臍帶單核細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31700 外周血白細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31701 乳腺上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31702 乳腺成纖維細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31703 前列腺上皮細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31704 胰島β細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31705 前列腺平滑肌細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31706 前列腺成纖維細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31707 甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*(LH)ELISA試劑盒 5 × 105次方（1ml）
31708 胰腺星狀細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31709 顱蓋造骨細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）
31710 滑膜細(xì)胞 5 × 105次方（1ml）

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5*(LH)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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