人雌二醇(E2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人雌二醇(E2)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

30915 HCPECL 人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30916 HCPEpiCL 人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30917 HCPFL 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30918 HMCL 人腦膜細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30919 HNL 人神經(jīng)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30920 HCGCL 人小腦顆粒細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30921 HN-h L 人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30922 HOPCL 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30923 HOPC-os L 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長(zhǎng)裂解物 200 µg 400 µg
30924 HSCL 人雪旺細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30925 HPCL 人神經(jīng)束膜細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30926 HAL 人星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30927 HA-c L 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30928 HA-sp L 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30929 HA-h L 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30930 HML 人小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30931 HDMECL 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30932 HDLECL 人真皮淋巴內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30933 HEKL 人表皮角質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30934 HEK-a L 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-成人裂解物 200 µg 400 µg
30935 HELM-l L 人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素裂解物 200 µg 400 µg
30936 HELM-m L 人表皮黑色素細(xì)胞-中色素裂解物 200 µg 400 µg
30937 HELM-d L 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素裂解物 200 µg 400 µg
30938 HDF-f L 人真皮成纖維細(xì)胞-胎兒裂解物 200 µg 400 µg
30939 HDF-n L 人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒裂解物 200 µg 400 µg
30940 HDF-a L 人真皮成纖維細(xì)胞-成人裂解物 200 µg 400 µg
30941 HHDPCL 人毛乳頭細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30942 HHGMCL 人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30943 HHORSCL 人毛囊外根殼細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30944 HHIRSCL 人毛囊內(nèi)根殼細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30945 HLECL 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30946 HLFL 人淋巴成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30947 HOKL 人口腔角質(zhì)細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30948 HGFL 人牙齦成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30949 HPLFL 人牙周膜成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30950 HEEpiCL 人食道上皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30951 HESMCL 人食道平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30952 HIMECL 人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30953 HISMCL 人腸平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30954 HCSMCL 人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30955 HPMECL 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30956 HPAECL 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30957 HPASMCL 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30958 HPAFL 人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30959 HPAEpiCL 人肺泡上皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30960 HBEpiCL 人支氣管上皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30961 HTEpiCL 人氣管上皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30962 HSAEpiCL 人小氣道上皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30963 HPFL 人肺成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30964 HBSMCL 人支氣管平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30965 HTSMCL 人氣管平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30966 HSkMCL 人骨骼肌細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30967 HSkMSCL 人骨骼肌衛(wèi)生細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30968 HSkMML 人骨骼肌成肌細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30969 HRGECL 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30970 HRPTEpiCL 人腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30971 HRCEpiCL 人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞裂解物人雌二醇(E2)ELISA試劑盒 200 µg 400 µg
30972 HREpiCL 人腎上皮細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30973 HRMCL 人腎系膜細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg
30974 HBdSMCL 人膀胱平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg 400 µg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人雌二醇(E2)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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