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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-09 18:52:04瀏覽次數(shù):117次
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人降鈣素(CT)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人降鈣素(CT)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人降鈣素(CT)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
30729 PAM 前脂肪細胞培養(yǎng)基 500 ml
30730 PADM 前脂肪細胞分化培養(yǎng)基 500 ml
30731 MSCM 間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 500 ml
30732 MODM 間充質(zhì)干細胞成骨細胞分化培養(yǎng)基 500 ml
30733 MADM 間充質(zhì)干細胞脂肪細胞分化培養(yǎng)基 500 ml
30734 SMCM-sf 平滑肌細胞培養(yǎng)基 500 ml
30735 NM 神經(jīng)細胞培養(yǎng)基 500 ml
30736 OPCM 少突膠質(zhì)前體細胞培養(yǎng)基 500 ml
30737 OsM 球狀少突細胞培養(yǎng)基 500 ml
30738 KM 角質(zhì)細胞培養(yǎng)基 500 ml
30739 KM-d 角質(zhì)細胞培養(yǎng)基(特定) 500 ml
30740 FM-sf 成纖維細胞培養(yǎng)基 500 ml
30741 TEpiCM 扁桃體上皮細胞培養(yǎng)基 500ml
30742 OKM 口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基 500 ml
30743 BEpiCM 支氣管上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30744 SAEpiCM 小氣道上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30745 EpiCM-2 上皮細胞培養(yǎng)基-2 500 ml
30746 UCM 尿道上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30747 PEpiCM 前列腺上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30748 CEpiCM 角膜上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30749 OEpiCM 卵巢上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30750 MSCM-sf 間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 500 ml
30751 MCDM 間充質(zhì)干細胞軟骨細胞分化培養(yǎng)基 500 ml
30752 MEpiCM 乳腺上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30753 KM-acf 角質(zhì)細胞培養(yǎng)基 500 ml
30754 FM-acf 成纖維細胞培養(yǎng)基 500 ml
30755 MSCM-acf 間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 500ml
30756 ECM-prf 內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30757 SMCM-prf 平滑肌細胞培養(yǎng)基 500 ml
30758 SMCM-sf-prf 平滑肌細胞培養(yǎng)基 500 ml
30759 PM-prf 周邊細胞培養(yǎng)基 500 ml
30760 MenCM-prf 腦膜細胞培養(yǎng)基 500 ml
30761 NM-prf 神經(jīng)細胞培養(yǎng)基 500 ml
30762 OPCM-prf 少突膠質(zhì)前體細胞培養(yǎng)基 500 ml
30763 OsM-prf 球狀少突細胞培養(yǎng)基 500 ml
30764 OM-prf 少突膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基 500 ml
30765 OPCDM-prf 少突膠質(zhì)前體細胞分化培養(yǎng)基 500 ml
30766 SCM-prf 雪旺細胞培養(yǎng)基 500 ml
30767 AM-prf 星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基 500 ml
30768 MM-prf 小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基 500 ml
30769 FM-prf 成纖維細胞培養(yǎng)基 500 ml
30770 FM-sf-prf 成纖維細胞培養(yǎng)基 500 ml
30771 FM-acf-prf 成纖維細胞培養(yǎng)基 500 ml
30772 FM-2-prf 成纖維細胞培養(yǎng)基-2 500 ml
30773 TEpiCM-prf 扁桃體上皮細胞培養(yǎng)基 500ml
30774 OKM-prf 口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基 500 ml
30775 AEpiCM-prf 肺泡上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30776 BEpiCM-prf 支氣管上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30777 SAEpiCM-prf 小氣道上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30778 SkMCM-prf 骨骼肌細胞培養(yǎng)基 500 ml
30779 EpiCM-prf 上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30780 EpiCM-2-prf 上皮細胞培養(yǎng)基-2 500 ml
30781 EpiCM-a-prf 動物上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30782 MCM-prf 腎系膜細胞培養(yǎng)基 500 ml
30783 UCM-prf 尿道上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30784 PEpiCM-prf 前列腺上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
30785 ObM-prf 成骨細胞培養(yǎng)基人降鈣素(CT)ELISA試劑盒 500 ml
30786 SM-prf 滑膜細胞培養(yǎng)基 500 ml
30787 NPCM-prf 髓核細胞培養(yǎng)基 500 ml
30788 HM-prf 肝細胞培養(yǎng)基 500 ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人降鈣素(CT)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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