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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-20 22:35:03瀏覽次數(shù):158次
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人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
30604 HOCF 人眼球脈絡膜成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30605 HConEC 人結膜上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30606 HVCEC 人絨毛膜毛細血管內(nèi)皮細胞 1 x 10^6 cells/vial
30607 HAmEpiC 人羊膜上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30608 HVT 人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞 1 x 10^6 cells/vial
30609 HVMF 人絨毛間充質(zhì)成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30610 HAMSC 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30611 HCMSC 人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30612 HAMEC 人脂肪微血管內(nèi)皮細胞 1 x 10^6 cells/vial
30613 HPA-v 人前脂肪細胞-內(nèi)臟 1 x 10^6 cells/vial
30614 HPA-s 人前脂肪細胞-皮下 1 x 10^6 cells/vial
30615 HOMEC 人卵巢微血管內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30616 HOSEpiC 人卵巢表層上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30617 HOF 人卵巢成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30618 HAMSC 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30619 HCMSC 人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30620 HMSC-bm 人骨髓間充質(zhì)干細胞 5 x 10^5 cells/vial
30621 HMSC-ad 人脂肪間充質(zhì)干細胞 5 x 10^5 cells/vial
30622 HMSC-hp 人肝臟間充質(zhì)干細胞 5 x 10^5 cells/vial
30623 HUMSC 人臍帶間充質(zhì)干細胞 5 x 10^5 cells/vial
30624 HPMSC 人肺間充質(zhì)干細胞 5 x 10^5 cells/vial
30625 HVMSC 人脊柱間充質(zhì)干細胞 5 x 10^5 cells/vial
30626 HMMEC 人乳腺微血管內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30627 HMEpiC 人乳腺上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30628 HMF 人乳腺成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30629 HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30630 HUAEC 人臍動脈內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30631 HUVSMC 人臍靜脈平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30632 HUASMC 人臍動脈平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30633 RPC 大鼠垂體細胞 5 x 10^5 cells/vial
30634 RMC 大鼠腦膜細胞 5 x 10^5 cells/vial
30635 RN-r 大鼠腦脊神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30636 RN-c 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30637 RGC 大鼠顆粒細胞 1 x 10^6 cells/vial
30638 RN-h 大鼠海馬神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30639 RN-sn 大鼠黑質(zhì)神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30640 RN-s 大鼠紋狀體神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30641 RN-vsc 大鼠腹脊髓神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30642 RN-dsc 大鼠背脊髓神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30643 ROPC 大鼠少突膠質(zhì)前體細胞 5 x 10^5 cells/vial
30644 RSC 大鼠雪旺細胞 5 x 10^5 cells/vial
30645 RPNF 大鼠周神經(jīng)成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30646 RA 大鼠星形膠質(zhì)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30647 RA-c 大鼠小腦星形膠質(zhì)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30648 RA-h 大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30649 RM 大鼠小膠質(zhì)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30650 RLF 大鼠淋巴成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30651 RPAEpiC 大鼠肺泡上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30652 RRTEpiC 大鼠腎小管上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30653 RHSteC 大鼠肝星形細胞 5 x 10^5 cells/vial
30654 RCM 大鼠心肌細胞 1 x 10^6 cells/vial
30655 RMSC 大鼠間充質(zhì)干細胞-骨髓 5 x 10^5 cells/vial
30656 MPC 小鼠垂體細胞 5 x 10^5 cells/vial
30657 MMenC 小鼠腦膜細胞 5 x 10^5 cells/vial
30658 MN-r 小鼠腦脊神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30659 MN-sn 小鼠黑質(zhì)神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30660 MN-s 小鼠紋狀體神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30661 MN-h 小鼠海馬趾神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30662 MN-c 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30663 MGC 小鼠顆粒細胞 人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒1 x 10^6 cells/vial
30664 MN-vsc 小鼠腹脊髓神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
30665 MN-dsc 小鼠背脊髓神經(jīng)元 1 x 10^6 cells/vial
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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